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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
19100 HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha) ELISA Kit 人低氧誘導因子1α 96T
19101 MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色素細胞抗體 96T
19102 Lp- Alpha ELISA Kit 大鼠脂蛋白α 96T
19103 HMGB-1(Mouse High mobility group protein B1) ELISA Kit 小鼠高遷移率族蛋白B1 96T
19104 F VIII -Ag ELISA Kit 大鼠*Ⅷ相關抗原 96T
19105 TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit 人轉鐵蛋白受體 96T
19106 EL(Mouse Endothelial lipase) ELISA Kit 小鼠內皮脂肪酶 96T
19107 CA(Mouse carbonic anhydrase) ELISA Kit 小鼠碳酸酐酶 96T
19108 P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53 96T
19109 FIX ELISA Kit 大鼠*IX 96T
19110 F X ELISA Kit 大鼠*Ⅹ 96T
19111 CGRP(Mouse calcitonin gene related peptide) ELISA Kit 小鼠降鈣素基因相關肽 96T
19112 Human Cyclin-D3 ELISA Kit 人細胞周期素D3 96T
19113 Human Cyclin-D2 ELISA Kit 人細胞周期素D2 96T
19114 MTL(Mouse Motilin) ELISA Kit 小鼠胃動素 96T
19115 VWF ELISA Kit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 96T
19116 PAP ELISA Kit 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物 96T
19117 SS(Mouse Somatostatin) ELISA Kit 小鼠* 96T
19118 Human Cyclin-D1 ELISA Kit 人細胞周期素D1 96T
19119 ES(Human Endostatin) ELISA Kit 人內皮抑素 96T
19120 Fbg(Mouse Fibrinogen) ELISA Kit 小鼠血纖蛋白原 96T
19121 TAT ELISA Kit 大鼠*抗*復合物 96T
19122 ATR ELISA Kit 大鼠抗*受體 96T
19123 FE(Human ferritin) ELISA Kit 人鐵蛋白 96T
19124 PAF(Mouse plaet activating factor) ELISA Kit 小鼠血小板活化因子 96T
19125 TR ELISA Kit 大鼠*受體 96T
19126 MTF(Human microtransferrinuria) ELISA Kit 人微量轉鐵蛋白 96T
19127 sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α 96T
19128 MYS(Mouse Myosin) ELISA Kit 小鼠肌球蛋白 96T
19129 cTn- I ELISA Kit 大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ 96T
19130 TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1 96T
19131 PI3K ELISA Kit 大鼠磷酸肌醇3激酶 96T
19132 MHC I /H-2 I (Mouse major histocompatibility complex I ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類 96T
19133 MBP(Human myelin basic protein autoantibody) ELISA Kit 人髓鞘堿性蛋白抗體 96T
19134 PKB ELISA Kit 大鼠蛋白激酶B 96T
19135 GATA4Mouse GATA binding protein 4) ELISA Kit 小鼠GATA結合蛋白4 96T
19136 TPA(Human Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit 人組織多肽抗原 96T
19137 Human lung cancer Marker ELISA Kit 人肺癌標志物 96T
19138 IP-10/CXCL10(Mouse interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 小鼠干擾素誘導蛋白10 96T
19139 sIgA ELISA Kit 大鼠分泌型免疫球蛋白A 96T
19140 human gastric carcinoma Marker ELISA Kit 人胃癌標志物 96T
19141 HO-2 ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶2 96T
19142 ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 小鼠上皮中性粒細胞活化肽78 96T
19143 OLAb(Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody) ELISA KIT 小鼠氧化低密度脂蛋白抗體 96T
19144 Cr ELISA Kit 大鼠骨膠原交聯 96T
19145 HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人鱗狀上皮細胞癌抗原2 96T
19146 C I CP ELISA Kit 人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽 96T
19147 Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 人胰腺癌標志物CA242 96T
19148 ASMA(Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體 96T
19149 Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 人胃腸癌標志物CA199 96T
19150 M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細胞系MESPU30 96T
19151 DPD ELISA Kit 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 96T
19152 PY ELISA Kit 大鼠吡啶交聯物 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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