人蛋白激酶CbetaII(PKCbII)ELISA試劑盒說明書
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
19370 C1INH(Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit 小鼠補體1抑制物抗體 96T
19371 ANG- I R(Human angiotension I receptor Antibody) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體 96T
19372 Gelsolin ELISA Kit 大鼠凝溶膠蛋白 96T
19373 PABA(Mouse para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 小鼠對氨基苯甲酸 96T
19374 OVA sIgG(Human ovalbumin specific IgG) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgG 96T
19375 RANKL ELISA Kit 大鼠核因子κB受體活化因子配基 96T
19376 CAM-ab(Human anti-calmodulin specific antibody) ELISA Kit 人抗鈣調素特異抗體 96T
19377 TpP ELISA Kit 大鼠血栓前體蛋白 96T
19378 hs-CRP(Mouse high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 小鼠超敏C反應蛋白 96T
19379 Beta2-GP1 IgA/G/M(Mouse Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 96T
19380 INH-B ELISA Kit 大鼠抑制素B 96T
19381 THAA(Human thyroid hormone autoantibodies) ELISA Kit 人甲狀腺非肽激素抗體 96T
19382 LAT(Mouse Linker for activation of T cell) ELISA Kit 小鼠T細胞活化連接蛋白 96T
19383 SCA(Human steroid producing cell autoantibody) ELISA Kit 人抗類固醇生成細胞抗體 96T
19384 ISR- Beta ELISA Kit 大鼠胰島素受體β 96T
19385 GHbA1c ELISA Kit 大鼠糖化血紅蛋白A1c 96T
19386 GS-ANA(Human granulocyte specific antinuclear antibody) ELISA Kit 人粒細胞特異性抗核抗體 96T
19387 EMAb(Mouse Endometrium Antibody) ELISA Kit 小鼠抗子宮內膜抗體 96T
19388 LDL-IC(Mouse LDL-IC) ELISA Kit 小鼠低密度脂蛋白免疫復合物 96T
19389 LFA-3/CD58 ELISA Kit 大鼠淋巴細胞功能相關抗原3 96T
19390 SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆粒抗體 96T
19391 BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉抗體 96T
19392 UU-Ab(Mouse Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 小鼠解脲脲原體抗體 96T
19393 sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1 96T
19394 cmDNA(Human anti-cell membrane DNA antibody) ELISA Kit 人抗細胞膜DNA抗體 96T
19395 MHC III /AgB III /H-1 III ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類 96T
19396 GFAP(Mouse glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 小鼠神經膠質纖維酸性蛋白 96T
19397 ACAST-D IV (Human autoantibodies against the C-terminal domain IV ) ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體 96T
19398 MHC II /AgB II /H-1 II ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類 96T
19399 pANCA(Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 小鼠抗中性粒細胞核周抗體 96T
19400 BMP-7 ELISA Kit (Rabbit) 兔骨成型蛋白7 96T
19401 PI Ab-IgG/IgM(Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
19402 OVA sIgE(Human ovalbumin specific IgE) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgE 96T
19403 AFA/snoRNP/U3RNP(Human anti-fibrillarin antibody) ELISA Kit 人抗核仁纖維蛋白抗體 96T
19404 15-LO/LOX(Mouse 15-lipoxygenase) ELISA Kit 小鼠15脂加氧酶 96T
19405 HA ELISA Kit 大鼠透明質酸 96T
19406 SLE(Human systemic lupus erythematosus) ELISA Kit 人系統性紅斑狼瘡 96T
19407 Glp-1 ELISA Kit 大鼠胰高血糖素樣肽1 96T
19408 IFN- Beta/IFNB(Mouse Interferon Beta) ELISA Kit 小鼠β干擾素 96T
19409 Tn- I (Mouse Troponin I ) ELISA Kit 小鼠肌鈣蛋白Ⅰ 96T
19410 CCK ELISA Kit 大鼠膽囊收縮素/腸促*肽 96T
19411 GM1(Human anti-ganglioside antibody) ELISA Kit 人抗*抗體 96T
19412 MAG Ab(Human anti-myelin associated glycoprotein antibody) ELISA Kit 人抗髓鞘相關糖蛋白抗體 96T
19413 BGP/Gehrelin ELISA Kit 大鼠腦腸肽 96T
19414 SAA(Mouse Serum amyloid A)ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A 96T
19415 ACA(Mouse anti-centrol and centrosome antibody)ELISA Kit 小鼠抗中性粒/中心體抗體 96T
19416 ANGA(Human anti-neutrophil granules antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆粒抗體 96T
19417 6-K-PG ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素 96T
19418 ANA(Human anti-neutrophil antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞抗體 96T
19419 apo-A1 ELISA Kit 人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒 大鼠載脂蛋白A1 96T
19420 Hpt/HP(Mouse Haptoglobin)ELISA Kit 小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白 96T
19421 apo-B100 ELISA Kit 大鼠載脂蛋白B100 96T
19422 16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyestrogen 1)ELISA Kit Hpt/HP小鼠16α羥基雌酮1 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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