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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 18:21:44瀏覽次數(shù):272次
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人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
19689 ASA(Human Anti-Somatic Muscle Antibody) ELISA Kit 人抗骨骼肌抗體 96T
19690 sP-selectin(Mouse soluble P-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性P選擇素 96T
19691 TAb(Human Thyroid Antibody) ELISA Kit 人甲狀腺抗體 96T
19692 S-100(Mouse Soluble protein-100) ELISA Kit 小鼠S100蛋白 96T
19693 MCP-3/CCL7 ELISA Kit 大鼠單核細胞趨化蛋白3 96T
19694 M-CSF ELISA Kit 大鼠巨噬細胞集落刺激因子 96T
19695 IL-1(Mouse Interleukin 1) ELISA Kit 小鼠白介素1 96T
19696 ICA(Human islet cell antibody) ELISA Kit 人胰島細胞抗體 96T
19697 SDA(Human salivary duct autoantibody) ELISA Kit 人抗唾液腺導管組織抗體 96T
19698 MDC/CCL22 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞來源的趨化因子 96T
19699 IL-1 Beta(Mouse Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 小鼠白介素1β 96T
19700 MSA(Human mitotic spindle apparatus antibody) ELISA Kit 人抗紡錘體抗體 96T
19701 MYO/MB(Mouse Myoglobin) ELISA Kit 小鼠肌紅蛋白 96T
19702 MIP-2 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎性蛋白2 96T
19703 AKA(Human Anti-keratin antibody) ELISA Kit 人抗角蛋白抗體 96T
19704 TXB2(Mouse Thromboxane B2) ELISA Kit 小鼠血栓素B2 96T
19705 MIP-3 Beta/ELC/CCL19 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β 96T
19706 MMP-1 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1 96T
19707 ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit 小鼠乙酰* 96T
19708 pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞核周抗體 96T
19709 cANCA(human anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞胞漿抗體 96T
19710 MMP-10 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10 96T
19711 LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4 96T
19712 aPT1/aPT2(Human anti-prothrombins antibodies) ELISA Kit 人抗凝血素抗體 96T
19713 MMP-13 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13 96T
19714 LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體 96T
19715 PF/PFP(Mouse Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 小鼠穿孔素 96T
19716 PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
19717 MMP-3 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3 96T
19718 MMP-7 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7 96T
19719 Synuclein mouse ELISA kit 小鼠突觸素 96T
19720 Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 96T
19721 mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG 96T
19722 mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM 96T
19723 mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 96T
19724 Cath Ab(Human Cathepsin Antibodies) ELISA Kit 人組織蛋白酶抗體 96T
19725 MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 96T
19726 MMP-8 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶 96T
19727 LF/LTF Ab-Ig(Human Lactoferrin antibody IgG) ELISA kit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG 96T
19728 BPI-Ab(Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody) ELISA Kit 人抗殺菌通透性增高蛋白抗體 96T
19729 5-NT ELISA Kit 大鼠5核苷酸酶 96T
19730 MPO-ANCA IgG(Human myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG) ELISA kit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG 96T
19731 OPG ELISA Kit 大鼠骨保護素 96T
19732 BF ELISA Kit 大鼠B因子 96T
19733 PR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3抗體IgG 96T
19734 Alpha-Fodrin IgG/IgA(Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 96T
19735 OSM ELISA Kit 大鼠抑瘤素M 96T
19736 PLGF ELISA Kit 大鼠胎盤生長因子 96T
19737 ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 96T
19738 Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體 96T
19739 RANTES/CCL5 ELISA kit 大鼠正常T細胞表達和分泌因子 96T
19740 dsDNA(Human anti-double stranded DNA) ELISA KIT 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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