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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人α-內*肽(α-EP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人α-內*肽(α-EP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人α-內*肽(α-EP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
19796 IGFBP-1 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1 96T
19797 anti-HDV(Human anti-hepatitis D virus antibody) ELISA Kit 人抗丁型肝炎病毒抗體 96T
19798 Human anti-HCV ELISA Kit 人抗丙型肝炎病毒抗體 96T
19799 VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 大鼠血管內皮細胞生長因子受體1 96T
19800 VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 大鼠血管內皮細胞生長因子受體2 96T
19801 Human anti-typhus antibody ELISA Kit 人抗斑疹傷寒抗體 96T
19802 HGF ELISA Kit 大鼠肝細胞生長因子 96T
19803 LLO(Human listeriolysin O) ELISA Kit 人單核細胞增多性李斯特菌素O 96T
19804 gp130 ELISA Kit 大鼠糖蛋白130 96T
19805 HBxAg(Human hepatitis B virus X Ag) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X抗原 96T
19806 GH ELISA Kit 大鼠生長激素 96T
19807 AAV(Human adeno-associated virus) ELISA Kit 人腺相關病毒 96T
19808 G-CSF ELISA Kit 大鼠粒細胞集落刺激因子 96T
19809 HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 96T
19810 St-Ag(Human Salmonella typhi antigen) ELISA Kit 人傷寒抗原 96T
19811 NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 大鼠中性粒細胞趨化蛋白2 96T
19812 HTLV- I (Human T-lymphotropicvirus I ) ELISA Kit 人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒 96T
19813 Flt3 ELISA Kit 大鼠FMS樣*激酶3 96T
19814 MV(Human morbillivirus) ELISA Kit 人麻疹病毒 96T
19815 Flt3L ELISA Kit 大鼠FMS樣*激酶3配體 96T
19816 EP(Human epidemic parotitis) ELISA Kit 人流行性腮腺炎 96T
19817 bFGF-9 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子9 96T
19818 EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG 96T
19819 bFGF-4 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子4 96T
19820 bFGF-6 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子6 96T
19821 Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit 人痢疾內阿米巴抗原 96T
19822 aFGF-1 ELISA Kit 大鼠酸性成纖維細胞生長因子1 96T
19823 Human Lyme IgG ELISA Kit 人萊姆IgG 96T
19824 Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit 人空腸彎曲菌黏附蛋白 96T
19825 FASL ELISA Kit 大鼠凋亡相關因子配體 96T
19826 CPAF(Human chlamydial protease-like activity factor) ELISA Kit 人衣原體蛋白酶樣活性因子 96T
19827 FAS/CD95 ELISA Kit 大鼠凋亡相關因子 96T
19828 EPO ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素 96T
19829 PV-IgG(Human Poliomyelitis Virus) ELISA Kit 人脊髓灰質炎病毒IgG 96T
19830 EPOR ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素受體 96T
19831 T.gondii(Human Toxoplasma Gondii ELISA Kit 人剛地弓形蟲 96T
19832 Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1 96T
19833 anti-PIV IgG (Human Poliomyelitis Virus) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgG抗體 96T
19834 ECF ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化因子 96T
19835 BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit 人大皰性類天皰瘡抗體 96T
19836 Human Enterovirus ELISA Kit 人腸病毒 96T
19837 EG-VEGF ELISA Kit 大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子 96T
19838 1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶 96T
19839 Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit 人包蟲抗體IgG 96T
19840 PT(Human Pertussiu Toxin) ELISA Kit 人百日咳毒素 96T
19841 CD30 ELISA Kit 大鼠CD30分子 96T
19842 C.albicans(Human Candida Albicans) ELISA Kit 人白色念珠菌 96T
19843 E-Cad ELISA Kit 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白 96T
19844 Human Coronaviruses IgG ELISA kit 人流行性乙型腦炎抗體IgG 96T
19845 BTC ELISA Kit 人α-內*肽(α-EP)ELISA試劑盒 大鼠β細胞素 96T
19846 Human Coronaviruses IgG ELISA kit 人冠狀病毒 96T
19847 ANG-2 ELISA Kit 大鼠血管生成素2 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人α-內*肽(α-EP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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