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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
20325 BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 96T
20326 PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶前體 96T
20327 PDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶A3 96T
20328 SDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人*脫氫酶 96T
20329 PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順反異構酶 96T
20330 OCT(Human ornithine carbamoyl transferase) ELISA Kit 人*氨基甲酰轉移酶 96T
20331 vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit 人內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑 96T
20332 PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋白磷酸酶 96T
20333 TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶 96T
20334 HLE(Human leukocyte exastase) ELISA Kit 人白細胞彈性蛋白酶 96T
20335 Human Elastase ELISA Kit 人彈性蛋白酶 96T
20336 AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit 人α* 96T
20337 ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人堿性磷酸酶 96T
20338 AZU(Human azurocidin) ELISA Kit 人天青殺素 96T
20339 ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit 人血管緊張肽酶A 96T
20340 PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit 人胰* 96T
20341 AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶 96T
20342 Human Collagenase Type II ELISA Kit 人膠原酶II 96T
20343 Human Collagenase I ELISA Kit 人膠原酶I 96T
20344 P-PKC(Human phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 人磷酸化蛋白激酶C 96T
20345 pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 人磷酸化細胞外信號調節激酶 96T
20346 AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit 人乙酰*酯酶 96T
20347 GOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶 96T
20348 TH(Human tyrosine hydroxylase) ELISA Kit 人*羥化酶 96T
20349 DDC(Human dopamine decarboxylase) ELISA Kit 人多巴胺脫羧酶 96T
20350 NNE(Human non-neuronal enolase) ELISA Kit 人非神經元性烯醇化酶 96T
20351 DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase) ELISA Kit 人多巴胺-β羥化酶 96T
20352 CHAc(Human choline acetylase) ELISA Kit 人*乙酰化酶 96T
20353 ICD(Human isocitrate dehydrogenase) ELISA Kit 人異檸檬酸脫氫酶 96T
20354 Try- II (Human Trypsinogen-2) ELISA Kit 人*原Ⅱ 96T
20355 ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit 人腺苷脫氨酶 96T
20356 HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明質酸酶 96T
20357 AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit 人天*氨基轉移酶 96T
20358 ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit 人酸性磷酸酶 96T
20359 GPI(Human glucose-6-phosphate isomerase) ELISA Kit 人葡萄糖6磷酸異構酶 96T
20360 PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit 人磷酸葡萄糖變位酶 96T
20361 LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶 96T
20362 SK(Human Streptokinase) ELISA Kit 人鏈激酶 96T
20363 RNASE(Human Ribonuclease) ELISA Kit 人核糖核酸酶 96T
20364 LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit 人過氧化脂質/乳過氧化物酶 96T
20365 PON(Human paraoxonase) ELISA Kit 人對氧磷酶 96T
20366 PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶 96T
20367 BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit 人β葡萄糖醛酸苷酶 96T
20368 Human Beta-glucosidase ELISA Kit 人β葡糖苷酶 96T
20369 Human Beta-lactamase ELISA Kit 人β內酰胺酶 96T
20370 Beta Manase(Human Alpha mannosidase) ELISA Kit 人β甘露糖苷酶 96T
20371 BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit 人β半乳糖苷酶 96T
20372 IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit 人αL艾杜糖苷酸酶 96T
20373 Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 人α2抗纖溶酶 96T
20374 NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) 人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒ELISA Kit 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 96T
20375 PAL(Human L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 人L苯*解氨酶 96T
20376 5-NT(Human 5-Nucleotidase) ELISA Kit 人5核苷酸酶 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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