小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒廠家
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人細胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人細胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人細胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
20377 1,3- BetaD-Glu(Human 1,3- BetaD glucosidase) ELISA Kit 人1,3-βD葡葡糖苷酶 96T
20378 CK(Human Creatine Kinase) ELISA Kit 人肌酸激酶 96T
20379 TR(Human targeted ribonuclease) ELISA Kit 人靶向核糖核酸酶 96T
20380 PKC(Human protein kinase C) ELISA Kit 人蛋白激酶C 96T
20381 ALD(Human Aldolase) ELISA Kit 人醛縮酶 96T
20382 L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳酸脫氫酶 96T
20383 ASM(Human acid sphingomyelinase) ELISA Kit 人酸性神經鞘磷脂酶 96T
20384 ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人花生四烯酸5脂加氧酶 96T
20385 5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人5脂加氧酶 96T
20386 AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸環化酶1 96T
20387 sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸環化酶 96T
20388 ODC(Human Ornithine decarboxylase) ELISA Kit 人*脫羧酶 96T
20389 PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白*激酶 96T
20390 PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白*磷酸酶 96T
20391 TACE(Human TNF Alpha converting enzyme) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α轉化酶 96T
20392 PMN Elastase(Human Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit 人多形核白細胞彈性蛋白酶 96T
20393 uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人*型纖溶酶原激活物 96T
20394 KLK 8(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人*8 96T
20395 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人*6 96T
20396 FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二磷酸醛縮酶 96T
20397 cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人組織蛋白酶D 96T
20398 HSL(Human hormone sensitive lipase) ELISA Kit 人激素敏感性脂肪酶 96T
20399 PK(Human pancreatickininogenase) ELISA Kit 人* 96T
20400 ACO-2(Human aconitase 2) ELISA Kit 人烏頭酸酶2 96T
20401 26S PSM(Human 26S proteasome) ELISA Kit 人26S蛋白酶體 96T
20402 CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶4 96T
20403 PLAP(Human Placental alkaline pkosphatase) ELISA Kit 人胎盤堿性磷酸酶 96T
20404 RTKs(Human receptor tyrosine kinase) ELISA Kit 人受體*激酶 96T
20405 MAPK(Human mitogen activited protein kinase) ELISA Kit 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶 96T
20406 LZM(Human Lysozyme) ELISA Kit 人* 96T
20407 FAK(Human focal adhesion kinase) ELISA Kit 人黏著斑激酶 96T
20408 sPL-A2(Human soluble Phospholipase A2) ELISA Kit 人可溶性磷脂酶A2 96T
20409 DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ 96T
20410 Arg(Human Arginase) ELISA Kit 人*酶 96T
20411 NAP(Human neutrophilic alkaline phosphatase0 ELISA Kit 人中性粒細胞堿性磷酸酶 96T
20412 ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激酶 96T
20413 CKMB(Human cytokinin MB) ELISA Kit 人激動異構酶/細胞分裂素MB 96T
20414 MLCK(Human myosin light chain kinase) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈激酶 96T
20415 GSTpi(Human glutathione S-transferases0 ELISA Kit 人*硫轉移酶pi基因 96T
20416 GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit 人*S轉移酶 96T
20417 DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit 人泛素分解酶 96T
20418 sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂酶A2 96T
20419 E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛素連接酶 96T
20420 MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大細胞類* 96T
20421 DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素異構酶 96T
20422 E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素結合酶 96T
20423 PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit 人蛋白質二硫鍵異構酶 96T
20424 CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶 96T
20425 Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半*合成酶 人細胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒 96T
20426 E1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit 人泛素激活酶 96T
20427 PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人* 96T
20428 HK(Human Hexokinase) ELISA Kit 人己糖激酶 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人細胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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