人磷酸酶PP2A癌性抑制物(CIP2A)ELISA試劑盒說明書
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人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
20959 Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit 人富組蛋白 96T
20960 Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA Kit *樣轉錄體受體 96T
20961 Human filamentous hemagglutinin,FHA ELISA Kit 人絲狀血球凝集素 96T
20962 Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit 人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白 96T
20963 Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 人嗜環蛋白/親環素A 96T
20964 Human dystrophin ELISA Kit 人肌養蛋白 96T
20965 Human Collectin ELISA Kit 人膠原凝集素 96T
20966 Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit 人伴侶蛋白10 96T
20967 Human fibromodulin,FMOD ELISA Kit 人纖調蛋白 96T
20968 Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 人鈣網蛋白 96T
20969 Human omentin ELISA Kit 人網膜素 96T
20970 Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit 人基質γ羧基*蛋白 96T
20971 Human matrilysin,MAT ELISA Kit 人基質裂解蛋白/基質溶素 96T
20972 Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽 96T
20973 Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit 人溶酶體相關膜蛋白2 96T
20974 Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39 96T
20975 Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit 人不透光相關蛋白 96T
20976 Human flagellin ELISA Kit 人鞭毛蛋白 96T
20977 Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit 人多聚血清蛋白 96T
20978 Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 人胞漿免疫球蛋白 96T
20979 Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit 人纖維介素蛋白 96T
20980 Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit 人泛素蛋白 96T
20981 Human orosomucoid,ORM ELISA Kit 人類粘蛋白 96T
20982 Human Elastin,ELN ELISA Kit 人彈性蛋白 96T
20983 Human Involucrin,iNV ELISA Kit 人套膜蛋白 96T
20984 Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit 人肌腱蛋白R 96T
20985 Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit 人生長相關蛋白43 96T
20986 Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit 人cAMP反應元件結合蛋白 96T
20987 Human Agrin ELISA Kit 人聚集蛋白 96T
20988 Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 人Agouti相關蛋白 96T
20989 Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 人膜輔蛋白 96T
20990 Human elongin A,EloA ELISA Kit 人延伸蛋白A 96T
20991 Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 人酰化刺激蛋白 96T
20992 Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit 人殺菌性/通透性增加蛋白 96T
20993 Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit 人細胞外基質磷酸糖蛋白 96T
20994 Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 人復制蛋白A 96T
20995 Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚基質蛋白 96T
20996 Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 人抗原提呈相關轉運蛋白/T細胞活化蛋白 96T
20997 Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit 人免疫抑制酸性蛋白 96T
20998 Human Gliadin IgA ELISA Kit 人麥角蛋白IgA 96T
20999 Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人發動蛋白2 96T
21000 Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 人著絲粒蛋白B 96T
21001 Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit 人巨噬細胞刺激蛋白 96T
21002 Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白 96T
21003 Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit 人核基質蛋白22 96T
21004 Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚蛋白 96T
21005 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 人多藥耐藥相關蛋白 96T
21006 Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit 人高速泳動蛋白17 96T
21007 Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit 人空泡毒素相關蛋白A 96T
21008 Human vitronectin,VNR ELISA Kit 人玻連蛋白/體外粘連蛋白 96T
21009 Human vimentin,VIM ELISA Kit 人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒人波形蛋白 96T
21010 Human Surfactant Protein D,SP-D ELISA Kit 人表面活性蛋白D 96T
21011 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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