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人膠原蛋白Ⅱ（HCBⅡ）ELISA試劑盒

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產(chǎn)品簡介

人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒，ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細介紹

人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

23199 * 對照品 HPLC法含量測定 140659-200401 8mg/支
23200 氟尿苷對照品鑒別 140660-200401 10mg/支
23201 次黃嘌呤對照品次黃嘌呤HPLC含量測定用 140661-200301（暫行） 20mg/支
23202 對照品次黃嘌呤HPLC含量測定系統(tǒng)適應(yīng)性用 140662-200301 20mg/支
23203 * 標準品 *含量與鑒別 140664-200501 5mg/支
23204 * 標準品 HPLC法含量及效價測定用 140665-200501 1ml/支
23205 * 對照品 HPLC含量 140666-200501 50mg/支
23206 D-核糖對照品含量測定 140668-200301 10mg/支
23207 * 對照品 HPLC法含量測定 140669-200401 50mg/支
23208 * 對照品鑒別、HPLC法檢查 140670-200501 4mg/支
23209 乙酰半* 對照品含量測定 140671-200501 100mg/支
23210 N-乙酰-L-* 對照品含量測定 140672-200501 100mg/支
23211 L-* 對照品供鑒別及含量測定用 140673-200405 50mg/支
23212 * 對照品鑒別 140674-200401 10mg/支
23213 胞磷*鈉對照品 HPLC含量測定 140675-200401 100mg/支
23214 苯* 對照品含量測定 140676-200405 50mg/支
23215 L-* 對照品含量測定 140677-200405 50mg/支
23216 * 對照品含量測定 140680-200401 100mg/支
23217 * 對照品含量測定 140681-200401 100mg/支
23218 * 對照品含量測定 140682-200401 100mg/支
23219 異* 對照品含量測定 140683-200401 100mg/支
23220 * 對照品含量測定 140684-200401 100mg/支
23221 * 對照品含量測定 140685-200401 100mg/支
23222 * 對照品含量測定 140686-200401 100mg/支
23223 * 對照品含量測定 140687-200401 100mg/支
23224 * 對照品含量測定 140688-200401 100mg/支
23225 * 對照品含量測定 140689-200401 100mg/支
23226 L-* 對照品含量測定 140690-200401 100mg/支
23227 * 對照品含量測定 140691-200401 100mg/支
23228 * 對照品鑒別 140692-200301 200mg/支
23229 鹽酸* 對照品含量測定 140693-200401 100mg/支
23230 * 對照品 HPLC法含量測定 140697-200501 2ml/支
23231 * 對照品鑒別 140700-200401 25mg/支
23232 * 對照品 HPLC法含量測定 140701-200401 15mg/支
23233 N-（2）-L-丙氨酰-L-* 對照品含量測定 140702-200501 100mg/支
23234 去羥* 對照品含量測定 140703-200401 100mg/支
23235 琥珀酰明膠對照品含量測定 140704-200401 700mg/支
23236 L-* 對照品 HPLC法含量測定 140705-200401 600mg/支
23237 還原型* 對照品含量測定 140706-200401 200mg/支
23238 胸腺嘧啶對照品有關(guān)物質(zhì)檢查 140708-200401 100mg/支
23239 * 對照品含量測定 140709-200401 50mg/支
23240 * 對照品 UV法含量測定 140710-200401 20mg/支
23241 * 對照品 HPLC含量測定 140711-200401 266ug/支
23242 脫氧核糖胞嘧啶核苷酸鈉對照品脫氧核糖核酸鈉HPLC含量 140715-200501 20mg/支
23243 脫氧核糖腺嘌呤核苷酸鈉對照品脫氧核糖核酸鈉HPLC含量 140716-200501 20mg/支
23244 脫氧核糖胸腺嘧啶核苷酸鈉對照品脫氧核糖核酸鈉HPLC含量 140717-200501 20mg/支
23245 脫氧核糖*核苷酸鈉對照品脫氧核糖核酸鈉HPLC含量 140718-200501 20mg/支
23246 一磷酸腺苷二鈉對照品二丁酰*鈣薄層鑒別 140719-200501 20mg/支
23247 r-* 對照品 *片薄層鑒別 140723-200501 20mg/支
23248 * 對照品 *HPLC含量 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒140728-200501 10mg/支
23249 * 對照品鑒別用 140731-200501 1.6PNA單位/支
23250 *酶（大腸桿菌）對照品供*酶鑒別用 140732-200501 5mg/支
23251 *酶（歐文菌）對照品供*酶鑒別用 140733-200501 5mg/支

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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