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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-13 19:48:23瀏覽次數(shù):175次
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人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
23410 黃芪皂苷II 黃芪皂甙II Astragaloside II 84676-89-1 HPLC≥98% 10mg/支
23411 黃芪皂苷III 黃芪皂甙III Astragaloside III 84687-42-3 HPLC≥98% 10mg/支
23412 * Eugenol 97-53-0 HPLC≥98% 0.5ml/支
23413 黃楊堿 環(huán)維黃楊星D;環(huán)常綠黃楊堿D Cyclovirobuxine 860-79-7 滴定法≥99% 20mg/支
23414 紅景天苷 紅景天甙 Salidroside 10338-51-9 HPLC≥98% 20mg/支
23415 絡(luò)塞琳 Rosarin 84954-93-8 HPLC≥98% 20mg/支
23416 絡(luò)塞維 Rosavin 84954-92-7 HPLC≥98% 20mg/支
23417 絡(luò)緦 Rosin 85026-55-7 HPLC≥98% 20mg/支
23418 絡(luò)塞定 Rosiridin 100462-37-1 HPLC≥98% 20mg/支
23419 槐果堿 Sophocarpine 145572-44-7 HPLC≥98% 20mg/支
23420 花旗松素 二氫槲皮素;紫杉葉素;黃杉素 Taxifolin 480-18-2 HPLC≥98% 20mg/支
23421 槲皮素 Quercetin 117-39-5 HPLC≥98% 20mg/支
23422 槲皮苷 榭黃甙;槲皮甙;櫟素;橡皮苷 Quercitrin 522-12-3 HPLC≥98% 20mg/支
23423 * Artemether 71963-77-4 HPLC≥98% 20mg/支
23424 姜黃素 Curcumin 458-37-7 HPLC≥98% 20mg/支
23425 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin 24939-17-1 HPLC≥98% 20mg/支
23426 雙去氧基姜黃素 雙去甲氧基姜黃素 Bisdemethoxycurcumin 24939-16-0 HPLC≥98% 20mg/支
23427 莪術(shù)醇 姜黃醇 Curcumol 4871-97-0 HPLC≥98% 20mg/支
23428 金絲桃苷 槲皮素-3-半乳糖苷 Hyperoside 482-36-0 HPLC≥98% 20mg/支
23429 金絲桃素 Hypericin 548-04-9 HPLC≥98% 10mg/支
23430 絞股藍(lán)皂苷 Stevenleaf 此產(chǎn)品為絞股藍(lán)總皂苷 UV≥98% 20mg/支
23431 苦杏仁苷 扁桃苷 Amygdalin 29883-15-6 HPLC≥98% 20mg/支
23432 * Matrine 519-02-8 HPLC≥95% 20mg/支
23433 氧化* * Oxymatrine 16837-52-8 HPLC≥98% 20mg/支
23434 * 3,4-二羥基肉桂酸 Caffeic acid 331-39-5 HPLC≥98% 20mg/支
23435 * Lipoic acid 62-46-4 HPLC≥98% 20mg/支
23436 * D-* D-Glucosamine hydrochloride 66-84-2 HPLC≥98% 20mg/支
23437 * 四氫巴馬汀;延胡索乙素 Rotundine 10097-84-4 HPLC≥98% 20mg/支
23438 落新婦苷 Astilbin 29838-67-3 HPLC≥98% 20mg/支
23439 蘆丁 蕓香苷;蕓香葉苷;*;蘆丁蕓香苷;蕓香甙 Rutin 153-18-4 UV≥98% 20mg/支
23440 *甲素 *內(nèi)酯醇;*多甙 Triptolide 38748-32-2 HPLC≥98% 20mg/支
23441 *乙素 *乙素;*羥內(nèi)酯;*內(nèi)酯二醇 Tripdiolide 38647-10-8 HPLC≥98% 20mg/支
23442 *紅素 南蛇藤素 Celastrol 34157-83-0 HPLC≥98% 20mg/支
23443 *內(nèi)酯甲 *酯甲 Wilforlide A 84104-71-2 HPLC≥98% 20mg/支
23444 木犀草素 藤黃菌素 Luteolin 491-70-3 HPLC≥98% 20mg/支
23445 木犀草苷 木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青蘭苷 Cynaroside 1268798 HPLC≥98% 20mg/支
23446 沒食子酸 3,4,5-三羥基苯甲酸 Gallic acid 149-91-7 HPLC≥98% 20mg/支
23447 蒙花苷 Buddleoside 480-36-4 HPLC≥97% 20mg/支
23448 莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 HPLC≥98% 20mg/支
23449 芹菜素 芹黃素;5,7,4'-三羥基黃酮 Apigenin 520-36-5 HPLC≥98% 20mg/支
23450 青藤堿 Sinomenine 115-53-7 HPLC≥98% 20mg/支
23451 * 土當(dāng)歸酸 Oleanolic acid 508-02-1 HPLC≥98% 20mg/支
23452 * Sodium Aescinate 20977-05-3 HPLC≥98% 20mg/支
23453 * 戊五醇;五羥基戊烷;1,2,3,4,5-五羥基戊烷 Xylitol 87-99-0 HPLC≥98% 20mg/支
23454 鹽酸育亨賓 Yohimbine Hydrochloride 65-19-0 HPLC≥98% 20mg/支
23455 煙堿 尼古丁 L-Nicotine 20033 HPLC≥98% 20mg/支
23456 金雀花堿 野靛堿 Cytisine 485-35-8 HPLC≥98% 20mg/支
23457 * 秋水仙素 Colchicine 64-86-8 HPLC≥98% 20mg/支
23458 *元 薯蕷皂素;地奧配質(zhì) Diosgenin 512-04-9 HPLC≥98% 20mg/支
23459 * 薯蕷皂甙; 重樓皂苷III; 重樓皂甙III Dioscin 19057-60-4 HPLC≥98% 20mg/支
23460 原* 原薯蕷皂甙人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 Protodioscin 55056-80-9 HPLC≥98% 20mg/支
23461 蛇床子素 Osthole 484-12-8 HPLC≥98% 20mg/支
23462 麝香酮 Muscone 541-91-3 GC≥98% 0.15ml/支
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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