人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。
23894 木蘭花堿 Magnoflorine chloride 6681-18-1 HPLC≥98% 20mg/支
23895 甲基* Methyl hesperidin 11013-97-1 HPLC≥98% 20mg/支
23896 甲基原* Methyl protodioscin 54522-52-0 HPLC≥98% 20mg/支
23897 丹參酚酸B甲酯 Monomethyl lithospermate B HPLC≥98% 20mg/支
23898 桑辛素 Morusin 62596-29-6 HPLC≥98% 20mg/支
23899 桑皮苷A Mulberroside A 102841-42-9 HPLC≥98% 20mg/支
23900 桑皮苷C Mulberroside C 102841-43-0 HPLC≥98% 20mg/支
23901 丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide 551-08-6 HPLC≥98% 20mg/支
23902 甲基蓮心堿 Neferine 2292-16-2 HPLC≥98% 20mg/支
23903 新*內酯 Neoandrographolide 27215-14-1 HPLC≥98% 20mg/支
23904 氧化芍藥苷 Oxypaeoniflorin 39011-91-1 HPLC≥98% 20mg/支
23905 茯苓酸 Pachymic acid 29070-92-6 HPLC≥98% 20mg/支
23906 偽金絲桃素 假金絲桃素 Pseudohypericin 55954-61-5 HPLC≥98% 20mg/支
23907 大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside 113443-70-2 HPLC≥98% 20mg/支
23908 桑根酮C Sanggenone C 80651-76-9 HPLC≥98% 20mg/支
23909 洋川芎內酯A Senkyunolide A 62006-39-7 HPLC≥98% 50mg/支
23910 洋川芎內酯H Senkyunolide H 94596-27-7 HPLC≥98% 20mg/支
23911 洋川芎內酯I Senkyunolide I 94596-28-8 HPLC≥98% 20mg/支
23912 番瀉苷元A 番瀉甙元A Sennidin A 641-12-3 HPLC≥98% 20mg/支
23913 番瀉苷元B 番瀉甙元B Sennidin B 517-44-2 HPLC≥98% 20mg/支
23914 甜橙黃酮 5,6,7,3',4'-五甲氧基黃酮 Sinensetin 2306-27-6 HPLC≥98% 20mg/支
23915 斯皮諾素 棘苷 Spinosin 72063-39-9 HPLC≥98% 20mg/支
23916 具棲冬青苷 長梗冬青苷; 具棲冬青甙; 長梗冬青甙 Pedunculoside 42719-32-4 HPLC≥98% 20mg/支
23917 姜酮 Zingerone 122-48-5 HPLC≥98% 20mg/支
23918 α-香附酮 α-Cyperone 473-08-5 HPLC≥98% 20mg/支
23919 桑根酮D Sanggenone D 81422-93-7 HPLC≥98% 20mg/支
23920 連翹酯苷A 連翹酯素 Forsythoside A 79916-77-1 HPLC≥98% 20mg/支
23921 千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol 218916-52-0 HPLC≥98% 20mg/支
23922 歐當歸內酯A 歐當歸內酯 Levistilide A 分子式:C24H28O4
分子量:380
HPLC≥98% 20mg/支
23923 五味子丙素 Schisandrin C 61301-33-5 HPLC≥98% 20mg/支
23924 * 東莨菪堿氫溴酸鹽 Scopolamine hydrobromide; Hyoscine hydrobromide 114-49-8 HPLC≥98% 20mg/支
23925 漢* 漢黃芩甙 Wogonoside 51059-44-0 HPLC≥98% 20mg/支
23926 千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷 木蝴蝶素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷; 木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷；千層紙素-7-葡萄糖醛酸苷 Oroxyloside 分子式:C22H20O11
分子量:460.39 HPLC≥98% 5mg/支
23927 黃獨素B 黃獨乙素；黃藥子素B Diosbulbin B 20086-06-0 HPLC≥98% 20mg/支
23928 西貝母堿 西貝素；西貝堿 Sipeimine 61825-98-7 HPLC≥98% 20mg/支
23929 木蝴蝶苷A 木蝴蝶甙A Oroxin A 分子式:C21H20O10
分子量:432.38 HPLC≥98% 20mg/支
23930 木蝴蝶苷B 木蝴蝶甙B Oroxin B 分子式: C27H30O15
分子量:594.52 HPLC≥98% 20mg/支
23931 升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷 Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside 分子式:C35H52O9
分子量:616 HPLC≥98% 10mg/支
23932 金石蠶苷 金石蠶甙 Poliumoside 94079-81-9 HPLC≥98% 20mg/支
23933 連翹酯苷B 連翹酯甙B Forsythoside B 分子式:C34H44O19
分子量:756.70 HPLC≥98% 20mg/支
23934 棕櫚酸 Palmitic acid 1957-10-3 HPLC≥98% 20mg/支
23935 絞股藍皂苷XLIX Gypenoside XLIX 分子式:C52H86O21
分子量:1047.22 HPLC≥98% 10mg/支
23936 鹽酸黃柏堿 Phellodendrine chloride 104112-82-5 HPLC≥98% 10mg/支
23937 碘化木蘭花堿 木蘭花堿; 唐松草堿; 玉蘭堿; 洋玉蘭堿 Magnoflorine iodide 2141-9-5 HPLC≥98% 10mg/支
23938 (-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside 136997-64-3 HPLC≥98% 10mg/支
23939 1,2-二氯丙烷標準品 CAS號： 78-87-5 250mg
23940 1,3-二氯丙烯 標準品 CAS號： 542-75-6 250mg
23941 1-萘乙酸 86-87-3 1g
23942 2-(1-萘)乙酰胺 標準品 CAS號：86-86-2 1g
23943 2,2-DPA 茅草枯 標準品 CAS號：75-99-0 250mg
23944 2,4,5-T 2，4，5-涕標準品人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 CAS號： 93-76-5 250mg
23945 2,4-D 2，4-滴 標準品 CAS號：94-75-7 250mg
23946 2,4-DB 2，4-滴丁酸 標準品 CAS號：94-82-6 250mg
23947 2,6-DIFLUOROBENZOIC ACID 2,6-二氟苯甲酸 標準品 CAS號：385-00-2 250mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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