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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
24168 敵草隆 標準品 CAS號:330-54-1 250mg
24169 多果定 標準品 CAS號:1g
24170 多拉菌素 標準品 CAS號:117704-25-3 100mg
24171 *鹽(脫氧*)標準品 CAS號:標準品 CAS號: 24390-14-5 100mg
24172 因滅汀(Emamectin-benzoate(苯甲酸鹽)) 155569-91-8 250mg
24173 硫丹(α+β~2+1)標準品 CAS號: 115-29-7 250mg
24174 草燕滅一水合物 標準品 CAS號:62059-43-2 250mg
24175 異狄氏劑 標準品 CAS號:72-20-8 250mg
24176 * 標準品 CAS號:標準品 CAS號:93106-60-6 100mg
24177 氟環唑 標準品 CAS號:135319-73-2 100mg
24178 依普菌素 標準品 CAS號:123997-26-2 100mg
24179 丙草丹 標準品 CAS號:759-94-4 250mg
24180 * 標準品 CAS號:114-07-8 100mg
24181 氟消草 標準品 CAS號:55283-68-6 250mg
24182 胺苯磺隆 標準品 CAS號:97780-06-8 100mg
24183 乙烯利 標準品 CAS號:16672-87-0 250mg
24184 乙硫磷 標準品 CAS號:563-12-2 250mg
24185 乙呋草黃 標準品 CAS號:26225-79-6 250mg
24186 乙氧酰胺苯甲酯 標準品 CAS號:100mg
24187 丙線磷 標準品 CAS號:13194-48-4 100MG
24188 乙氧喹啉 標準品 CAS號:91-53-2 250mg
24189 乙氧嘧磺隆 標準品 CAS號:126801-58-9 100mg
24190 乙氧嘧磺隆 標準品 CAS號:126801-58-9 100mg
24191 二溴乙烯 標準品 CAS號:106-93-4 1g
24192 1,1-二氯乙烯 標準品 CAS號: 75-35-4 500mg
24193 醚菊酯 標準品 CAS號:80844-07-1 100mg
24194 乙螨唑 標準品 CAS號:153233-91-1 10mg
24195 氯唑靈(土菌靈) 標準品 CAS號:2593-15-9 100mg
24196 丁香油酚 標準品 CAS號:97-53-0 250mg
24197 惡唑菌酮 標準品 CAS號:131807-57-3 2ml
24198 伐滅磷 標準品 CAS號:52-85-7 250mg
24199 咪唑菌酮 標準品 CAS號:161326-34-7 100mg
24200 克線磷 標準品 CAS號:22224-92-6 250mg
24201 氯苯嘧啶醇 標準品 CAS號:60168-88-9 250mg
24202 腈苯唑(解草唑) 標準品 CAS號:114369-43-6 100mg
24203 苯丁錫 標準品 CAS號:13356-08-6 250mg
24204 皮蠅磷 標準品 CAS號:299-84-3 250mg
24205 環酰菌胺 標準品 CAS號:126833-17-8 100mg
24206 殺螟硫磷 標準品 CAS號:122-14-5 250mg
24207 仲丁威 標準品 CAS號:3766-81-2 250mg
24208 2,4,5滴丙酸(2,4,5-TP) 標準品 CAS號:93-72-1 250mg
24209 苯硫威 標準品 CAS號:62850-32-2 100mg
24210 惡唑禾草靈 66441-23-4 100mg
24211 雙氧威 標準品 CAS號72490-01-8 250mg
24212 甲氰菊酯標準品 CAS號: 39515-41-8 250mg
24213 粉銹啉 標準品 CAS號:67306-03-0 250mg
24214 唑螨酯 標準品 CAS號:111812-58-9 100mg
24215 倍硫磷 標準品 CAS號:55-38-9 250mg
24216 氰戊菊酯 標準品 CAS號:51630-58-1 250mg
24217 氟蟲清(氟蟲腈) 標準品 CAS號:120068-37-3 100mg
24218 甲氟燕靈(麥草氟甲酯)標準品 CAS號: 52756-25-9 250mg
24219 嘧啶磺隆 標準品 CAS號:104040-78-0 50mg
24220 * 標準品 CAS號:76639-94-6 250mg
24221 嘧螨酯 標準品 CAS號:229977-93-9 100mg
24222 吡氟禾草靈 標準品 CAS號:69335-91-7 2ml
24223 氟啶胺 標準品 CAS號:79622-59-6 100mg
24224 啶蜱脲 標準品 人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒CAS號:86811-58-7 100mg
24225 氟苯噠唑 標準品 CAS號:31430-15-6 100mg
24226 氟酮磺隆 標準品 CAS號:79660-72-3 10ng/ul 10ml
24227 氟氰戊菊酯 標準品 CAS號:70124-77-5 100mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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