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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
24283 滅草喹 標準品 CAS號:81335-37-7 100mg
24284 咪唑乙* 標準品 CAS號:81335-77-5 100mg
24285 亞胺唑 標準品 CAS號:86598-92-7 10mg
24286 吡蟲啉 標準品 CAS號:138261-41-3 100mg
24287 雙胍辛胺 標準品 CAS號:13516-27-3 10mg
24288 惡二唑蟲 標準品 CAS號:144171-61-9 25mg
24289 甲基碘磺隆鈉鹽 標準品 CAS號:144550-36-7 100mg
24290 碘苯腈 標準品 CAS號:1689-83-4 100mg
24291 丙基喜樂松 標準品 CAS號:26087-47-8 100mg
24292 異菌脲 標準品 CAS號:36734-19-7 100MG
24293 丙森鋅 標準品 CAS號:140923-17-7 100MG
24294 氯唑磷 標準品 CAS號:42509-80-8 100MG
24295 異丁子香酚 標準品 CAS號:97-54-1 5ml
24296 異柳磷 標準品 CAS號:25311-71-1 100MG
24297 異丙隆 標準品 CAS號:34123-59-6 100MG
24298 異惡氟草 標準品 CAS號:141112-29-0 100MG
24299 * 標準品 CAS號:22071-15-4 100MG
24300 亞胺菌 標準品 CAS號:143390-89-0 100MG
24301 拉沙里菌素 標準品 CAS號:25999-20-6 250mg
24302 咪唑 標準品 CAS號:16595-80-5 250mg
24303 *(鹽酸鹽) 標準品 CAS號:21462-39-5 100mg
24304 林丹 標準品 CAS號:58-89-9 250mg
24305 林丹 標準品 CAS號:58-89-9 250mg
24306 利谷隆 標準品 CAS號:330-55-2 100mg
24307 氟丙氧脲 標準品 CAS號:103055-07-8 100mg
24308 馬杜霉素 標準品 CAS號:84878-61-5 100mg
24309 馬拉硫磷 標準品 CAS號:121-75-5 250MG
24310 抑芽丹 標準品 CAS號:123-33-1 250mg
24311 麻保沙星 標準品 CAS號:115550-35-1 100mg
24312 2甲4氯 標準品 CAS號:94-74-6 250MG
24313 2甲4氯丁酸 標準品 CAS號:94-81-5 100MG
24314 * 標準品 CAS號:31431-39-7 100MG
24315 滅蚜磷 標準品 CAS號:2595-54-2 100MG
24316 2甲4氯丙酸 標準品 CAS號:7085-19-0 100MG
24317 吡咯二酸二乙酯 標準品 CAS號:135590-91-9 100MG
24318 甲烯雌醇乙酸酯 標準品 CAS號:2919-66-6 100MG
24319 嘧菌胺標準品 CAS號: 110235-47-7 100mg
24320 縮節胺 標準品 CAS號:24307-26-4 100mg
24321 硫雙威 標準品 CAS號:59669-26-0 250mg
24322 甲磺胺磺隆 標準品 CAS號:208465-21-8 50mg
24323 硝磺酮 標準品 CAS號:104206-82-8 100mg
24324 精甲霜靈 標準品 CAS號:57837-19-1 100mg
24325 四聚乙醛 標準品 CAS號:108-62-3 1g
24326 苯橋蒽 標準品 CAS號:41394-05-2 100mg
24327 甲草苯隆 標準品 CAS號:18691-97-9 100mg
24328 乙丁烯酰磷 標準品 CAS號:62610-77-9 250mg
24329 甲胺磷 標準品 CAS號:10265-92-6 100mg
24330 滅草定標準品 CAS號: 20354-26-1 10mg
24331 殺撲磷 標準品 CAS號:950-37-8 100mg
24332 甲硫威 標準品 人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒 CAS號:2032-65-7 100mg
24333 滅多威,硫雙威 標準品 CAS號:59669-26-0 250mg
24334 烯蟲酯 標準品 CAS號:40596-69-8 100mg
24335 甲氧滴滴涕 標準品 CAS號:72-43-5 100mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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