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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
25486 5-硝基糠醛二乙酸酯 供TCL檢查用 101142-201001 100mg
25487 * 供鑒別用 101143-201001 100mg
25488 反式* 供檢查用 101144-201001 50mg
25489 去氟* 供檢查用 101145-201001 50mg
25490 N-甲基* 供檢查用 101146-201001 50mg
25491 4-羥基苯甲酸 供檢查用 101149-201001 50mg
25492 4-羥基間苯二甲酸 供檢查用 101150-201001 50mg
25493 * 供GC法含量 101151-201001 50mg
25494 二* 供檢查用 101152-201001 50mg
25495 間甲酚 供GC法含量 101153-201001 100mg
25496 對甲酚 供GC法含量 101154-201001 100mg
25497 *雜質Ⅱ 供檢查用 101158-201001 50mg
25498 *鈉 供HPLC法 101159-201001 100mg
25499 間氨基酚 供檢查用 101160-201001 50mg
25500 *鈉 供HPLC法 101163-201001 100mg
25501 N-(4-氟苯甲酰基)酪胺 供HPLC法系統適用性 101169-201001 30mg
25502 * 供檢查用 101175-201001 50mg
25503 * HPLC含量 101176-201001 200mg
25504 * 供TCL鑒別 101179-201001 100mg
25505 對氨基苯磺酸 供檢查用 101180-201001 50mg
25506 對丁氨基苯甲酸(*) 供TCL檢查用 101183-201001 50mg
25507 * HPLC含量 101185-201001 500mg
25508 *雜質 供HPLC法 101186-201001 50mg
25509 苯妥英 供IR鑒別 101187-201001 50mg
25510 * 供HPLC法 101192-201001 50mg
25511 *雜質Ⅱ 供HPLC法 101196-201001 100mg
25512 占噸酮(*Ⅱ) 供HPLC法 101199-201001 50mg
25513 坎利酮 供HPLC法 101202-201001 50mg
25514 二甲基砜 供檢查用 190007-201001 200mg
25515 羥苯甲酯(對羥基苯甲酸甲酯) 供檢查用 190008-201001 100mg
25516 羥苯丙酯(對羥基苯甲酸丙酯) 供檢查用 190009-201001 100mg
25517 羥苯丁酯(對羥基苯甲酸丁酯) 供檢查用 190010-201001 100mg
25518 N-乙烯-2-吡咯烷酮 供檢查用 190012-201001 1ml
25519 一縮二丙二醇 供檢查用 190020-201001 1ml
25520 二縮三丙二醇 供檢查用 190021-201001 1ml
25521 棕櫚酸 供系統適用性 190029-201001 500mg
25522 棕櫚酸甲酯 供檢查用 190030-201001 50mg
25523 硬脂酸 供系統適用性 190032-201001 500mg
25524 硬脂酸甲酯 供檢查用 190033-201001 50mg
25525 花生酸甲酯 供檢查用 190035-201001 50mg
25526 山崳酸甲酯 供檢查用 190037-201001 25mg
25527 二十四烷酸甲酯 供檢查用 190039-201001 25mg
25528 異山梨酯 供鑒別用 190043-201001 100mg
25529 乙酸薄荷酯 供鑒別用 190044-201001 1ml
25530 交聯聚維酮 供鑒別用 190045-201001 100mg
25531 鄰苯二甲酸二乙酯 供鑒別用 190047-201001 1ml
25532 環拉酸鈉 供鑒別用 190048-201001 200mg
25533 山崳酸甘油酯 供鑒別用 190049-201001 500mg
25534 醋酸纖維素人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒 供鑒別用 190050-201001 200mg
25535 聚丙烯酸樹脂Ⅱ 供鑒別用 190051-201001 200mg
25536 聚丙烯酸樹脂Ⅲ 供鑒別用 190052-201001 200mg
25537 聚丙烯酸樹脂Ⅳ 供鑒別用 190053-201001 500mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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