Mag-Bind Poly-Gel DNA Extraction Kit
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
25864 酪醇 含量測定 111676-200602 20mg
25865 正十五烷 內標 111677-200401 0.2ml
25866 *乙酯 含量測定 111678-200401 50mg
25867 檸檬酸 含量測定 111679-200401 100mg
25868 對二氯苯 含量測定 111682-200401 100mg
25869 鼠李糖 TCL法鑒別 111683-200401 100mg
25870 氫溴酸檳榔堿 含量測定 111684-200401 50mg
25871 川續斷皂苷 Ⅵ(木通皂苷 D) 含量測定 111685-200802 20mg
25872 人參皂苷 Rb3 含量測定 111686-201002 20mg
25873 牡荊素(牡荊苷) 含量測定 111687-200602 20mg
25874 天然*(右旋龍腦) 含量測定 111688-200501 50mg
25875 β,β-二甲基丙烯酰阿卡寧 含量測定 111689-200502 20mg
25876 白果新酸 檢查 111690-200702 20mg
25877 香荊芥酚 含量測定 111691-200501 0.15ml
25878 甘油三油酸酯 含量測定 111692-200501 0.15ml
25879 甘油三*酯 含量測定 111693-201002 0.15ml
25880 十七碳酸甲酯 含量測定 111694-200501 20mg
25881 槐角苷 含量測定 111695-200501 20mg
25882 蓮心堿高氯酸鹽 含量測定 111696-200501 20mg
25883 鴨腳樹葉堿 含量測定 111697-200802 20mg
25884 異阿魏酸 含量測定 111698-200602 20mg
25885 高良姜素 含量測定 111699-200501 20mg
25886 梣酮 含量測定 111700-200602 20mg
25887 白楊素 含量測定 111701-200501 20mg
25888 芥子堿硫氰酸鹽 含量測定 111702-200501 20mg
25889 芒柄花素 鑒別 111703-200602 20mg
25890 染料木素 含量測定 111704-200501 20mg
25891 (-)-薄荷酮 GC法含量測定 111705-200602 0.2ml
25892 胡薄荷酮 含量測定 111706-201004 0.2ml
25893 * 含量測定 111707-200501 20mg
25894 鷹嘴豆芽素 A 含量測定 111708-200501 20mg
25895 染料木苷 含量測定 111709-200501 20mg
25896 升麻素 含量測定 111710-200501 20mg
25897 白花前胡甲素 含量測定 111711-200602 20mg
25898 竹節香附素 A 含量測定 111712-200501 20mg
25899 刺五加苷 E 含量測定 111713-200502 20mg
25900 亥茅酚苷 含量測定 111714-200501 20mg
25901 人參皂苷 Rb2 含量測定 111715-200802 10mg
25902 1,5-O-二咖啡酰奎寧酸 含量測定 111717-200501 20mg
25903 白屈菜紅堿 含量測定 111718-200501 20mg
25904 人參皂苷 Rf 鑒別 111719-200703 10mg
25905 木犀草苷 含量測定 111720-200905 20mg
25906 冬凌草甲素 含量測定 111721-200501 20mg
25907 地膚子皂苷 Ic 含量測定 111723-200602 20mg
25908 3,29-二苯甲酰基栝樓仁三醇 111724- 20mg
25909 奇任醇 含量測定 111726-200601 20mg
25910 胡黃連苷 I 含量測定 111727-200501 20mg
25911 柳穿魚葉苷 含量測定 111728-201001 20mg
25912 哈巴苷 鑒別 111729-200603 20mg
25913 哈巴俄苷 含量測定人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒 111730-200605 20mg
25914 秦皮素 含量測定 111731-200501 20mg
25915 黨參炔苷 鑒別 111732-200804 10mg
25916 常春藤皂苷元 含量測定 111733-200904 20mg
25917 紫蓳靈 含量測定 111734-200601 20mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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