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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-07 07:48:54瀏覽次數(shù):214次
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人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
25972 莰烯 供鑒別用 111805-201001 40mg
25973 姜酮 供鑒別用 111807-201001 20mg
25974 相思子堿 供鑒別用 111808-201001 20mg
25975 異槲皮苷 供鑒別用 111809-201001 20mg
25976 連翹酯苷A 含量測定 111810-201001 20mg
25977 連翹酯苷B 含量測定 111811-201001 20mg
25978 金石蠶苷 含量測定 111812-201001 20mg
25979 川續(xù)斷皂苷乙 含量測定 111813-201001 20mg
25980 灰氈毛忍冬皂苷乙 含量測定 111814-201001 20mg
25981 柳穿魚黃素 供鑒別用 111815-201001 20mg
25982 花旗松素 供含量測定 111816-201001 20mg
25983 苦蒿素 供含量測定 111817-201001 20mg
25984 人參皂苷Rd 供含量測定 111818-201001 20mg
25985 羌活醇 含量測定 111820-201001 20mg
25986 紫花前胡苷 供鑒別用 111821-201001 20mg
25987 廣藿香酮 鑒別 111822-201001 20mg
25988 歐當歸內(nèi)酯A 供鑒別 111826-201001 20mg
25989 京尼平苷酸 供含量測定用 111828-201001 20mg
25990 喬松素 供含量測定用 111829-201001 20mg
25991 榿木酮 含量測定 111830-201001 20mg
25992 酸漿苦味素L 供鑒別用 111831-201001 20mg
25993 苷松新酮 供鑒別用 111832-201001 20mg
25994 6-姜辣素 供含量測定用 111833-201001 0.2ml
25995 1-甲基海因 供鑒別 111836-201001 20mg
25996 去氫二異* 供含量測定用 111838-201001 20mg
25997 川楝素 供含量測定用 111842-201001 20mg
25998 安五脂素 供鑒別用 111844-201001 20mg
25999 23-乙酰澤瀉醇B 含量測定 111846-201001 20mg
26000 紫草氰苷 供鑒別用 111847-201001 20mg
26001 3,6-二芥子酰基蔗糖 供含量測定 111848-201001 20mg
26002 細葉遠志皂苷 供含量測定 111849-201001 20mg
26003 遠志口山酮 供含量測定 111850-201001 20mg
26004 桔梗皂苷D 供含量測定 111851-201001 20mg
26005 寶藿苷Ⅰ 供含量測定用 111852-201001 20mg
26006 王不留行黃酮苷 供含量測定用 111853-201001 20mg
26007 槲皮素-3-O-β-D- 葡萄糖 供含量測定用 111854-201001 20mg
26008 偽原*(暫行) 供含量測定用 111855-201001 20mg
26009 巴豆苷 供含量測定用 111856-201001 20mg
26010 新* 供含量測定用 111857-201001 20mg
26011 絡(luò)石苷 供含量測定用 111858-201001 20mg
26012 α-松油醇(暫行) 鑒別 111859-201001 0.1ml
26013 楊梅苷 供含量測定用 111860-201001 20mg
26014 竹節(jié)參皂苷ⅠVa (暫行) 供含量測定用 111861-201001 20mg
26015 三百草酮 供含量測定用 111863-201001 20mg
26016 櫟癭酸 鑒別 111864-201001 20mg
26017 馬錢苷酸 供含量測定用 111865-201001 20mg
26018 大戟二烯醇 含量測定 111866-201001 20mg
26019 長梗冬青苷 供含量測定用 111868-201001 20mg
26020 斯皮諾素 供含量測定用人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒 111869-201001 20mg
26021 迷迭香酸 供含量測定用 111871-201001 20mg
26022 8-0-乙酰山梔苷甲酯 供含量測定用 111872-201001 20mg
26023 山梔苷甲酯 供含量測定用 111873-201001 20mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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