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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
26026 洋艾素 供含量測定用 111879-201001 20mg
26027 α-常春藤皂苷 供含量測定用 111880-201001 20mg
26028 格列風內酯 供鑒別 111883-201001 20mg
26029 款冬酮 供含量測定用 111884-201001 20mg
26030 蟛蜞菊內脂 供含量測定用 111885-201001 20mg
26031 旱蓮苷A 薄層色譜 111886-201001 20mg
26032 太子參環肽B 供含量測定用 111887-201001 20mg
26033 對羥基苯乙酮 供含量測定 111897-201001 20mg
26034 芫花素(暫行) 供含量測定 111899-201001 20mg
26035 橙黃決明素(暫行) 供含量測定用 111900-201001 20mg
26036 芹菜素 供含量測定用 111901-201001 20mg
26037 人參皂苷Ro 供鑒別用 111903-201001 20mg
26038 山麥冬皂苷B 供鑒別用 111907-201001 20mg
26039 短亭山麥冬皂苷C 供鑒別用 111908-201001 20mg
26040 魯斯可皂苷 111909-201001
26041 木通苯乙醇苷B (荷苞花苷) 含量測定 111910-201001 20mg
26042 *苷H 供含量 111913-201001 10mg
26043 大車前苷 含量測定 111914-201001 20mg
26044 木蝴蝶苷B 供鑒別用 111915-201001 20mg
26045 4-羥基苯乙酸 供含量測定 111916-201001 20mg
26046 女貞苷 供含量測定 111918-201001 10mg
26047 瓜子金皂苷己 供含量測定 111921-201001 20mg
26048 商陸皂苷甲 供含量測定 111922-201001 20mg
26049 黃柏酮 供含量測定 111923-201001 20mg
26050 蒼術素 供鑒別與 111924-201001 20mg
26051 乙酰哈巴苷 供含量測定 111925-201001 20mg
26052 特女貞苷 含量測定 111926-201001 20mg
26053 異鉤藤堿 供鑒別用 111927-201001 20mg
26054 丁公藤(光葉丁公藤) TLC法鑒別 120901-200504 1.0g
26055 大黃(唐古特大黃) TLC法鑒別 120902-200609 0.6g
26056 牛蒡子 TLC法鑒別 120903-200608 0.5g
26057 甘草(甘草) TLC法鑒別 120904-200914 1.0g
26058 白芍 TLC法鑒別 120905-200508 0.5g
26059 血竭 TLC法鑒別 120906-200609 0.1g
26060 紅花 TLC法鑒別 120907-200609 0.5g
26061 連翹 TLC法鑒別 120908-200914 1.0g
26062 吳茱萸 TLC法鑒別 120909-200508 0.5g
26063 荊芥 TLC法鑒別 120911-200709 0.8g
26064 益母草 TLC法鑒別 120912-200507 1.0g
26065 黃連(三角葉黃連) TLC法鑒別 120913-201008 0.5g
26066 檳榔 TLC法鑒別 120915-200810 1.5g
26067 薄荷 TLC法鑒別 120916-200508 0.5g
26068 人參 TLC法鑒別 120917-200609 1.0g
26069 川芎 TLC法鑒別 120918-200809 1.0g
26070 廣防己 TLC法鑒別 120919-200304 3.0g
26071 馬兜鈴(北馬兜鈴) TLC法鑒別 120920-200604 3.0g
26072 木香 TLC法鑒別 120921-201008 0.5g
26073 五味子(北五味子) TLC法鑒別 120922-201007 1.0g
26074 丹參 TLC法鑒別人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒 120923-200610 1.0g
26075 平貝母 TLC法鑒別 120924-200707 5.0g
26076 白術 TLC法鑒別 120925-200708 0.5g
26077 肉豆蔻 TLC法鑒別 120926-200505 1.0g
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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