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人輪狀病毒抗原（RV Ag）ELISA試劑盒

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人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

26081 蘇合香 TLC法鑒別 120931-200202 1ml
26082 蒼術(shù)(茅蒼術(shù)) TLC法鑒別 120932-200405 0.5g
26083 佛手 TLC法鑒別 120933-200303 1.0g
26084 何首烏 TLC法鑒別 120934-201009 0.5g
26085 羌活(羌活) TLC法鑒別 120935-201007 0.5g
26086 枳實(shí)（酸橙） TLC法鑒別 120936-201005 1.0g
26087 關(guān)黃柏 TLC法鑒別 120937-201007 0.5g
26088 蛇膽汁 TLC法鑒別 120938-200104 10mg
26089 首烏藤 TLC法鑒別 120939-200705 0.25g
26090 獨(dú)活 TLC法鑒別 120940-2001010 1.0g
26091 三七 TLC法鑒別 120941-200807 1.0g
26092 干姜 TLC法鑒別 120942-200907 2.0g
26093 廣山楂 TLC法鑒別 120943-200402 4.0g
26094 天麻 TLC法鑒別 120944-200608 0.6g
26095 白芷（杭白芷） TLC法鑒別 120945-201008 1.0g
26096 西青果 TLC法鑒別 120946-9903 2.0g
26097 防風(fēng) TLC法鑒別 120947-200907 3.0g
26098 返魂草（麻葉千里光） TLC法鑒別 120948-200903 10g
26099 郁金（溫郁金） TLC法鑒別 120949-201005 1.0g
26100 茵陳(濱蒿) TLC法鑒別 120950-200706 1.5g
26101 前胡(白花前胡) TLC法鑒別 120951-200704 1.0g
26102 降香 TLC法鑒別 120952-201007 1.0g
26103 桃仁（桃） TLC法鑒別 120953-200705 1.0g
26104 餓螞蝗 TLC法鑒別 120954-200204 1.0g
26105 黃芩 TLC法鑒別 120955-200607 0.5g
26106 紫菀 TLC法鑒別 120956-200505 1.0g
26107 墨旱蓮 TLC法鑒別 120958-200605 1.0g
26108 瓦松 TLC法鑒別 120959-200303 1.0g
26109 相思子 TLC法鑒別 120960-200203 5.0g
26110 狼毒（月腺大戟） TLC法鑒別 120961-200303 4.0g
26111 湖北貝母 TLC法鑒別 120962-200904 5.0g
26112 干蟾皮 TLC法鑒別 120963-200504 0.5g
26113 千里光 TLC法鑒別 120964-200707 10g
26114 木芙蓉葉 TLC法鑒別 120965-200703 1.0g
26115 仙鶴草 TLC法鑒別 120966-200505 1.0g
26116 沒(méi)藥（天然沒(méi)藥） TLC法鑒別 120967-200903 1.0g
26117 陳皮 TLC法鑒別 120969-200808 1.0g
26118 乳香 TLC法鑒別 120970-200904 0.5g
26119 南* TLC法鑒別 120971- 5.0g
26120 浙貝母 TLC法鑒別 120972-200404 1.0g
26121 莪術(shù)（蓬莪術(shù)） TLC法鑒別 120973- 1.0g
26122 黃芪（蒙古黃芪） TLC法鑒別 120974-200609 1.0g
26123 黑豆 TLC法鑒別 120975-200604 5.0g
26124 山豆根 TLC法鑒別 120976-200503 2.0g
26125 北豆根 TLC法鑒別 120977-200303 1.0g
26126 白鮮皮 TLC法鑒別 120978-200604 1.0g
26127 羅布麻葉 TLC法鑒別 120979-200503 2.0g
26128 虎杖 TLC法鑒別 120980-200804 0.5g
26129 枳殼(酸橙) TLC法鑒別 120981-200403 1.0g
26130 麝香 TLC法鑒別人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒 120982-200303 20mg
26131 蒼術(shù)(北蒼術(shù)) TLC法鑒別 120983-201004 0.5g
26132 大黃（藥用大黃） TLC法鑒別 120984-200301 1.4g
26133 砂仁（陽(yáng)春砂） TLC法鑒別 120985-200505 1.0g
26134 梔子 TLC法鑒別 120986-200605 1.0g

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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