植物金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒現(xiàn)貨說明書
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-07 09:09:34瀏覽次數(shù):164次
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人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
26247 土荊皮(金錢松) TLC法鑒別 121099-200101 1.0g
26248 百合 TLC法鑒別 121100-200402 1.0g
26249 肉蓯蓉 TLC法鑒別 121101-200402 1.0g
26250 紅大戟 TLC法鑒別 121102-200202 3.0g
26251 紅芪 TLC法鑒別 121103-200602 5g
26252 卷柏(墊狀卷柏) TLC法鑒別 121104-200301 2.0g.
26253 麥芽 TLC法鑒別 121105-200803 10g
26254 花椒 TLC法鑒別 121106-200903 2.0g
26255 蘆根 TLC法鑒別 121107-201003 1.0g
26256 扶芳藤 TLC法鑒別 121108-200702 10.0g
26257 伸筋草 TLC法鑒別 121109-200401 1.0g
26258 雞冠花 TLC法鑒別 121110-200702 2.0g
26259 苦楝皮(楝) TLC法鑒別 121111-200502 2g
26260 明黨參 TLC法鑒別 1g
26261 佩蘭 TLC法鑒別 121113-200402 1g
26262 金蕎麥 TLC法鑒別 121114-200302 1.0g
26263 金櫻根 TLC法鑒別 121115-200604 2.5g
26264 卷柏(卷柏) TLC法鑒別 121116-200503 2g
26265 茯苓 TLC法鑒別 4g
26266 南五味子 TLC法鑒別 121118-200502 1.0g
26267 南鶴虱 TLC法鑒別 121119-200502 1.0g
26268 香櫞 TLC法鑒別 1g
26269 蓮子 TLC法鑒別 121121-200603 5g
26270 凌霄花 TLC法鑒別 121122-200402 0.5g
26271 桑葉 TLC法鑒別 121123-200603 2.0g
26272 桑白皮 TLC法鑒別 2g
26273 旋覆花(旋覆花) TLC法鑒別 121125-200402 2.0g
26274 地蜈蚣 TLC法鑒別 121126-200401 2g
26275 錦燈籠 TLC法鑒別 121127-200502 1.0g
26276 藁本(藁本) TLC法鑒別 121128-200501 1g
26277 藁本(遼藁本) TLC法鑒別 121129-200401 1.0g
26278 薤白(小根蒜) TLC法鑒別 121130-200402 4.0g
26279 鶴虱 TLC法鑒別 121131-200401 2.0g
26280 ■蟾酥 TLC法鑒別 121132- 0.2g
26281 松葉 TLC法鑒別 121133-200702 5.0g
26282 人參蘆頭 TLC法鑒別 121134-200001 0.5g
26283 廣藿香 TLC法鑒別 121135-200503 1.0g
26284 山麥冬 TLC法鑒別 121136-200302 1.0g
26285 山藥 TLC法鑒別 121137-200402 2.0g
26286 山楂(山里紅) TLC法鑒別 121138- 3g
26287 天冬 TLC法鑒別 121139-200603 1.0g
26288 毛冬青 TLC法鑒別 121140-200502 1.5g
26289 巴豆 TLC法鑒別 121141-200502 0.1g
26290 半邊蓮 TLC法鑒別 121142-200502 1g
26291 白屈菜 TLC法鑒別 121143-200302 2.0g
26292 白果 TLC法鑒別 121144-200602 1.0g
26293 白茅根 TLC法鑒別 121145-200502 1.0g
26294 江南卷柏 TLC法鑒別 121146-200001 10g
26295 地膽草 TLC法鑒別 121147-200502 2.5g
26296 地膚子 TLC法鑒別人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒 121148-200502 0.5g
26297 蘆薈(好望角蘆薈) TLC法鑒別 121149-200502 0.14g
26298 芥子 (芥) TLC法鑒別 121150-200001 2.0g
26299 花錨(橢圓葉花錨) TLC法鑒別 121151-200001 2.0g
26300 崗梅 TLC法鑒別 121152-200502 2.0g
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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