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人鉤端螺旋體IgM（Lebtospira）ELISA試劑盒

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人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

26411 芭蕉根 TLC法鑒別 121264-200502 1.0g
26412 蜂房 TLC法鑒別 121265-0301 0.5g
26413 * TLC法鑒別 121266-200502 1.0g
26414 博落回 TLC法鑒別 121267-0301 1.0g
26415 紫花杜鵑 TLC法鑒別 121268- 2.0g
26416 * TLC法鑒別 121269- 2.0g
26417 槐米 TLC法鑒別 121270-200602 2.0g
26418 半夏 TLC法鑒別 121272-200401 1.0g
26419 * TLC法鑒別 121274-200301 0.5g
26420 沙苑子 TLC法鑒別 121275-200402 1g
26421 肉蓯蓉（管花肉蓯蓉） / 121276-200501 1g
26422 黃荊子 TLC法鑒別 121277-200401 1.0g
26423 防已 TLC法鑒別 121279-200301 1.0g
26424 小葉榕 TLC法鑒別 121280-200604 20.0g
26425 土槿皮 TLC法鑒別 121281-0301 2.0g
26426 頭花蓼 TLC法鑒別 121282-200703 2.0g
26427 仙人掌 TLC法鑒別 121283-200502 10g
26428 玳瑁 TLC法鑒別 121284-200401 0.5g
26429 厚樸 TLC法鑒別 121285-200301 0.5g
26430 地榆(地榆) TLC法鑒別 121286-200402 2.0g
26431 胖大海 TLC法鑒別 121287-200503 5g
26432 走馬胎 TLC法鑒別 121288-200301 1.0g
26433 余甘子 TLC法鑒別 121289-200402 1.5g
26434 赤脛散 TLC法鑒別 121290-200301 0.2g
26435 土大黃（皺*模） TLC法鑒別 121291- 1.0g
26436 透骨香 TLC法鑒別 121292-200402 2.0g
26437 半枝蓮 TLC法鑒別 121293-200402 1.0g
26438 石椒草 TLC法鑒別 121294-200402 1.0g
26439 薯莨 TLC法鑒別 121295-0301 0.2g
26440 蒺藜 TLC法鑒別 121296-200703 3.0g
26441 石吊蘭 TLC法鑒別 121297- 2.0g
26442 隔山消 TLC法鑒別 121298-200402 1.0g
26443 大果木姜子 TLC法鑒別 121300-0301 0.5g
26444 羊奶奶葉 TLC法鑒別 121301- 5.0g
26445 見血飛 TLC法鑒別 121302-200301 1.0g
26446 甘草（脹果甘草） TLC法鑒別 121303-200502 1.0g
26447 莪術(shù)（溫郁金） TLC法鑒別 121304- 1g
26448 結(jié)石草 TLC法鑒別 121305-200301 2.0g
26449 紫色姜 TLC法鑒別 121306-200301 0.5g
26450 寬葉纈草 TLC法鑒別 121307-200301 1.0g
26451 薄芝菌絲體粉 TLC法鑒別 121308-200301 2.0g
26452 馬蘭草 TLC法鑒別 121309- 2.0g
26453 紫檀香 TLC法鑒別 121310- 0.5g
26454 絞股藍(lán) TLC法鑒別 121311-200402 2.0g
26455 鳳尾草 TLC法鑒別 121312-200301 1.0g
26456 鐵筷子 TLC法鑒別 121313-200503 2.0g
26457 吉祥草 TLC法鑒別 121314-200402 2.0g
26458 地瓜藤 TLC法鑒別 121315-200502 1.0g
26459 白英 TLC法鑒別 人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒121316- 5g
26460 苦菜子 TLC法鑒別 121317-200502 2.0g
26461 桃金娘根 TLC法鑒別 121318-200402 2.0g
26462 珠子草 TLC法鑒別 121319-200301 0.5g
26463 烏賊墨 TLC法鑒別 121320-200301 0.5g

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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