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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
27916 羥基積雪草酸 Madecassic acid ≥97%
27917 羥基酪醇 hydroxytyrosol ≥97%
27918 茄尼醇 Solanesol 98%
27919 芹菜素 Apigenin ≥98%
27920 秦皮苷 Fraxin ≥98%
27921 秦皮甲素 Aesculin ≥98%
27922 秦皮素 Fraxetin ≥98%
27923 秦皮乙素 Aesculetin ≥98%
27924 青* Artesunate ≥98%
27925 青藤堿 Sinomenine ≥98%
27926 氫溴東莨菪堿 Scopolamine Hydrobromide 97%
27927 * LAPPACONITINE HYDROBROMIDE 98%
27928 * Colchicine ≥97%
27929 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin ≥98%
27930 去甲異波爾定 Norisoboldine ≥98%
27931 去氫二異* Dehydrodiisoeugenol ≥95%
27932 去氫鉤藤堿 Corynoxeine ≥98%
27933 去氫荷包牡丹堿 Dehydrodicentrine 95%
27934 去氫木香內酯 Dehydrocostus lactone ≥98%
27935 去氧*內酯(*甲素,脫羥基*內酯,14-去氧*內酯) Deoxyandrographolide??? ≥95%
27936 染料木苷 Genistin ≥99%
27937 染料木素 Genistein ≥99%
27938 人參苷元F11 Aglycone - F11 ≥97%
27939 人參皂苷 Rh3 Ginsenoside Rh3 ≥98%
27940 人參皂苷Rb1 Ginsenoside-Rb1 ≥97%
27941 人參皂苷Rb2 Ginsenoside-Rb2 ≥95%
27942 人參皂苷Rb3 Ginsenoside-Rb3 ≥98%
27943 人參皂苷Rc Ginsenoside-Rc ≥96%
27944 人參皂苷Rd Ginsenoside-Rd ≥95% ≥98%
27945 人參皂苷Re Ginsenoside-Re ≥97%
27946 人參皂苷Rf Ginsenoside-Rf ≥96%
27947 人參皂苷Rg1 Ginsenoside-Rg1 ≥98%
27948 人參皂苷Rg2 Ginsenoside-Rg2 ≥97%
27949 人參皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 ≥98%
27950 人參皂苷Ro Ginsenoside-Ro ≥95%
27951 鞣花酸 Ellagic acid 98%
27952 * Daphnetin 95%
27953 三七皂苷R1 Notoginsenoside R1 ≥95% ≥97%
27954 三葉豆紫檀苷 trifolirhizin ≥97%
27955 傘形花內酯 Umbelliferone ≥95%
27956 桑皮苷A MulberrosideA 98%
27957 桑色素 Morin ≥90%
27958 瑟丹酸內酯 Sedanolide ≥97%
27959 山姜素 Alpinetin ≥98%
27960 山奈酚 Kaempferol ≥98%
27961 山奈酚葡萄糖醛酸苷 Kaempferol-?-O-glucuronide ≥98%
27962 山奈苷 KAEMPFEROL-3,7-DIRHAMNOSIDE 95%
27963 山梔苷甲酯 shanzhiside methyl ester 97%
27964 山茱萸新苷/山茱萸裂苷 Cornuside 90%
27965 商陸皂苷甲 Esculentoside A ≥98%
27966 商陸皂苷乙人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒 Esculentoside B 95% 98%
27967 商陸皂苷元 Phytolaccagenin ≥98%
27968 芍藥苷 Paeoniflorin ≥97%
27969 芍藥內酯苷 Alibiflorin ≥97%
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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