小鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)ELISA試劑盒廠家
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2016-12-30 13:33:35瀏覽次數(shù):200次
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人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
28518 玫瑰紅鈉瓊脂 250(g)
28519 玫瑰紅鈉瓊脂 1000(g)
28520 0.5%* 250(g)
28521 肉湯瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
28522 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g)
28523 *氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
28524 酪胨瓊脂 250(g)
28525 葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 250(g)
28526 抗生素檢定培養(yǎng)基4號 250(g)
28527 抗生素檢定培養(yǎng)基6號 250(g)
28528 抗生素檢定培養(yǎng)基7號 250(g)
28529 抗生素檢定培養(yǎng)基8號 250(g)
28530 抗生素檢定培養(yǎng)基8號(AM8) 250(g)
28531 卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
28532 抗生素檢定培養(yǎng)基5號 250(g)
28533 抗生素檢定培養(yǎng)基5號(AM5) 250(g)
28534 MUG培養(yǎng)基 100(g)
28535 真菌瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
28536 磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基 250(g)
28537 蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g)
28538 改良馬丁液體培養(yǎng)基 250(g)
28539 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
28540 膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基 250(g)
28541 氯化鈉-蛋白胨緩沖液(pH7.0) 250(g)
28542 檢定用培養(yǎng)基 250(g)
28543 Candida Elective瓊脂 250(g)
28544 DTM培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
28545 DRBC培養(yǎng)基 250(g)
28546 WORT瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28547 WORT肉湯基礎(chǔ) 250(g)
28548 BIGGY瓊脂 250(g)
28549 YGC瓊脂 250(g)
28550 改良綠色酵母菌和真菌肉湯 250(g)
28551 Littman瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28552 DG-18瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28553 YM瓊脂 250(g)
28554 YM11瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28555 OGY瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28556 WL營養(yǎng)瓊脂 250(g)
28557 沙氏BHI瓊脂 250(g)
28558 曲霉素瓊脂(AFPA) 250(g)
28559 *培養(yǎng)基 250(g)
28560 MH肉湯(MHB) 250(g)
28561 MH瓊脂(MHA) 250(g)
28562 中國藍(lán)瓊脂 250(g)
28563 克氏雙糖鐵瓊脂(KIA) 250(g)
28564 血液瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28565 血液* 250(g)
28566 氯化三苯四氮唑-沙保羅培養(yǎng)基 250(g)
28567 麥康凱瓊脂 250(g)
28568 堿性瓊脂平板人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 250(g)
28569 堿性膽鹽瓊脂 250(g)
28570 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28571 哥倫比亞瓊脂 250(g)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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