人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

29992 12164 HTM 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于副嗜血桿菌紙片擴(kuò)散法藥敏試 驗(yàn)，每升培養(yǎng)基中需添加  15mg 無 菌 NAD
29993 10134 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鮮乳中抗生素殘留檢驗(yàn)
29994 10266 LB 瓊脂LB  250g/瓶 含 0.5%NaCl，用于分子生物學(xué)中大 腸桿菌的培養(yǎng)
29995 10267 NZCYM 肉湯 250g/瓶 用于大腸桿菌菌株培養(yǎng)，配方被推 薦用于重組l噬菌體的復(fù)制
29996 10268 NZYM 肉湯 250g/瓶 不含酸水解酪蛋白，用于大腸桿菌 菌株培養(yǎng)，配方被*用于重組l 噬菌體的復(fù)制
29997 10269 Luria 肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 含  0.05%NaCl，用于大腸桿菌的培 養(yǎng)和保存，視需要每 1L 培養(yǎng)基中無 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液
29998 10270 Luria 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 含  0.05%NaCl，用于大腸桿菌的培 養(yǎng)和保存，視需要每 1L 培養(yǎng)基中無 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液
29999 10271 2×YT 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于重組大腸桿菌菌株的培養(yǎng)
30000 10272 M9 低鹽培養(yǎng)基 250g/瓶 用于制備  M9 低鹽培養(yǎng)基，培養(yǎng)重 組大腸桿菌菌株
30001 10274 麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 不含碳水化合物，用于大腸桿菌的 發(fā)酵研究
30002 10275 低限肉湯（不含葡萄糖） 250g/瓶 用于分離和表現(xiàn)營養(yǎng)突變型大腸桿 菌和枯草芽孢桿菌的特性
30003 10276 低限瓊脂 250g/瓶 用于分離和表現(xiàn)營養(yǎng)突變型大腸桿 菌的特性
30004 10277 SOC 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于基因工程大腸桿菌的培養(yǎng)
30005 10278 SOB 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于大腸桿菌分子遺傳學(xué)菌株的培 養(yǎng)
30006 10279 *肉湯Terrific 250g/瓶 用于大腸桿菌培養(yǎng)
30007 10280 選擇性 APS 肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 非動(dòng)物源配方，用于分子生物學(xué)試 驗(yàn)中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)
30008 10281 選擇性 APS 超級(jí)肉湯基礎(chǔ) 250g/瓶 非動(dòng)物源配方，用于培養(yǎng)重組大腸 桿菌菌株，提高質(zhì)粒產(chǎn)量
30009 11148 YPD 瓊脂 250g/瓶 用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中酵母菌的培 養(yǎng)和保存
30010 11149 YPD 肉湯 250g/瓶 用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中酵母菌的培 養(yǎng)和保存
30011 12111 K 氏培養(yǎng)基 250g/瓶 用于飲料中耐熱耐酸菌的檢測(cè)，需 使用蘋果酸調(diào)節(jié) pH
30012 10710 肝浸液培養(yǎng)基 250g/瓶 用于布魯氏菌屬分離
30013 10711 胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于布魯氏菌屬檢驗(yàn)
30014 12103 阿須貝氏（Ashby）培養(yǎng)基 250g/瓶 用于固氮菌的培養(yǎng)
30015 12105 根瘤菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于根瘤菌的保藏和培養(yǎng)
30016 12106 硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于硅酸鹽細(xì)菌的培養(yǎng)
30017 12107 固氮（莖瘤）根瘤菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于（莖瘤）根瘤菌培養(yǎng)
30018 12109 聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于固氮螺菌的培養(yǎng)
30019 12110 光合細(xì)菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于光合細(xì)菌的培養(yǎng)
30020 12144 *乳糖無電解質(zhì)培養(yǎng)基 250g/瓶 無抑制性，用于泌尿系統(tǒng)致病菌的分離和培養(yǎng)，也可做深部培養(yǎng)的貯 運(yùn)
30021 12145 包姜氏瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于百日咳桿菌的分離，需添加 1%甘油和 15%脫纖維羊血 50701
30022 12147 纖維素分解菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于纖維素分解菌的分離和鑒別， 纖維素分解菌周圍有紅色分解圈
30023 12159 腦膜炎奈瑟氏菌糖發(fā)酵瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于腦膜炎奈瑟氏菌糖發(fā)酵試驗(yàn)
30024 12161 幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng)，需添 加抗生素及馬血
30025 12401 碎肉培養(yǎng)基 250g/瓶 用于痤瘡丙酸桿菌的培養(yǎng)，不含維 生素  K，需添加  11002（庖肉牛肉 粒）
30026 11943 黃原膠液體發(fā)酵培養(yǎng)基 1 萬 ml/包 以葡萄糖為碳源，用于黃原膠生產(chǎn)
30027 12501 Tinsdale 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用 于 白 喉 桿 菌 的 分 離 培 養(yǎng) ， 每100ml 培養(yǎng)基中需添加  10ml  血清 以及 1 支 22501
30028 22501 Tinsdale 瓊脂基礎(chǔ)添加劑 5ml×10 支/盒 每支用于 100ml12501 中
30029 12502 亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng)，需添加 亞碲酸鉀及羊血
30030 12309 吡哆醇 Y 培養(yǎng)基 100g/瓶 用于吡哆醇測(cè)定
30031 12601 Korthof 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鉤端螺旋體的增菌培養(yǎng)，每 100ml 培養(yǎng)基中需添加兔（羊、或 馬）血清 8ml
30032 12610 EMJH 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鉤端螺旋體的增菌培養(yǎng)，每 90ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 22601
30033 12173 發(fā)根農(nóng)桿菌培養(yǎng)基 250g/瓶
30034 大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色
30035 大腸菌群顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌群大腸菌群培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色
30036 大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準(zhǔn)確同時(shí)檢測(cè)大腸桿菌和大腸菌群，培養(yǎng)24小時(shí)，大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色
30037 TBX 培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色
30038 細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基 250 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)菌總數(shù)，培養(yǎng)24小時(shí)，細(xì)菌顯紅色
30039 O157顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于O157菌的顯色培養(yǎng)
30040 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)
30041 李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)
30042 金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于*的顯色培養(yǎng)
30043 霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒 1000ml 用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)
30044 弧菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于弧菌的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧菌顯藍(lán)色，其它弧菌顯無色。
30045 坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng)，坂崎桿菌顯藍(lán)色，其它腸桿菌顯無色。
30046 尿道定位顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于分離和鑒別常見尿道致病菌

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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