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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
30790 CMM-prf 心肌細胞培養基 500 ml
30791 CEpiCM-prf 角膜上皮細胞培養基 500 ml
30792 TM-prf 滋養層細胞培養基 500 ml
30793 PAM-prf 前脂肪細胞培養基 500 ml
30794 PADM-prf 前脂肪細胞分化培養基 500 ml
30795 OEpiCM-prf 卵巢上皮細胞培養基 500 ml
30796 MSCM-prf 間充質干細胞培養基 500 ml
30797 MSCM-sf-prf 間充質干細胞培養基 500 ml
30798 MSCM-acf-prf 間充質干細胞培養基
30799 MODM-prf 間充質干細胞成骨細胞分化培養基 500 ml
30800 MADM-prf 間充質干細胞脂肪細胞分化培養基 500 ml
30801 MCDM-prf 間充質干細胞軟骨細胞分化培養基 500 ml
30802 MEpiCM-prf 乳腺上皮細胞培養基 500 ml
30803 ECGS 內皮細胞生長添加物 5 ml
30804 SMCGS 平滑肌細胞生長添加物 5 ml
30805 SMCGS-sf 平滑肌細胞生長添加物-無血清 5 ml
30806 PGS 周細胞生長添加物 5 ml
30807 MenCGS 腦膜細胞生長添加物 5 ml
30808 NGS 神經元生長添加物 5 ml
30809 OPCGS 少突膠質前體細胞生長添加物 5 ml
30810 OGS 少突膠質細胞生長添加物 5 ml
30811 OPCDS 少突膠質前體分化生長添加物 5 ml
30812 SCGS 雪旺細胞生長添加物 5 ml
30813 AGS 星形細胞生長添加物 5 ml
30814 MGS 小膠質細胞生長添加物 5 ml
30815 MGS 巨噬細胞生長添加物 5 ml
30816 KGS 角質細胞生長添加物 5 ml
30817 KGS-2 角質細胞生長添加物(不含BPE) 5 ml
30818 KGS-acf 角質細胞生長添加物(不含動物成分) 5 ml
30819 MelGS 黑色素細胞生長生長添加物 5 ml
30820 MelGS-2 黑色素細胞生長添加物(不含TPA) 5 ml
30821 FGS 成纖維細胞生長添加物 5 ml
30822 FGS-2 成纖維細胞生長添加物-2 5 ml
30823 FGS-acf 成纖維細胞生長添加物(不含動物成分) 5 ml
30824 TEpiCGS 扁桃體上皮細胞生長添加物
30825 OKGS 口腔角質細胞生長添加物 5 ml
30826 BEpiCGS 支氣管上皮細胞生長添加物 5 ml
30827 SAEpiCGS 小氣道上皮細胞生長添加物 5 ml
30828 SkMCGS 骨骼肌細胞生長添加物 5 ml
30829 EpiCGS 上皮細胞生長添加物 5 ml
30830 EpiCGS-2 上皮細胞生長添加物-2 5 ml
30831 EpiCGS-2-a 動物上皮細胞生長添加物-a 5 ml
30832 MCGS 腎系膜細胞生長添加物 5 ml
30833 UCGS 尿道上皮細胞生長添加物 5 ml
30834 PEpiCGS 前列腺上皮細胞生長添加物 5 ml
30835 ObGS 造骨細胞生長添加物 5 ml
30836 CGS 軟骨細胞生長添加物 5 ml
30837 SGS 滑膜細胞生長添加物 5 ml
30838 NPCGS 髓核細胞生長添加物 5 ml
30839 HGS 肝細胞生長添加物 5 ml
30840 SteCGS 星形細胞生長添加物 5 ml
30841 CMGS 心肌細胞生長添加物 5 ml
30842 CEpiCGS 角臘上皮細胞生長添加物 5 ml
30843 TGS 滋養層細胞生長添加物 5 ml
30844 PAdDS 前脂肪細胞分化生長添加物 5 ml
30845 PAGS 前脂肪細胞生長添加物 5 ml
30846 PAGS 人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒脂肪細胞生長添加物 5 ml
30847 OEpiCGS 卵巢上皮細胞生長添加物 5 ml
30848 MODS 間充質干細胞成骨細胞分化生長添加物 5 ml
30849 MADS 間充質干細胞脂肪細胞分化生長添加物 5 ml
30850 MSCGS 間充質干細胞生長添加物 5 ml
30851 MSCGS-2 間充質干細胞生長添加物-無血清 5 ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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