人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

32311 *乙素 Tripdiolide  38647-10-8   C20H27O7  376.4 20mg
32312 *紅素 Celastrol 34157-83-0 C29H38O4 450.61 20mg
32313 *內(nèi)酯酮 Triptolide,14-deoxy-14-oxo 38647-11-9 C20H22O6 358.39 10mg
32314 *定堿 Wtlfordine 37239-51-3 C43H49NO19 10mg
32315 *次堿 Wilforine 11088-09-8 C43H49O18  867.9 10mg
32316 *吉堿 Wilforgine 37239-47-7 C41H47NO19 857.81 10mg
32317 *內(nèi)酯甲 Wilforlide A 84104-71-2  C30H46O3  454.68 20mg
32318  去甲澤拉木醛 Demethylzeylasteral  107316-88-1  C29H36O6 480.59 20mg
32319 龍膽苦苷 Gentiopicroside 20831-76-9 C16H20O9 356.32 20mg
32320 龍膽山酮酚 Bellidifolin
2798-25-6
C14H10O6 274.22
10mg
32321 羅漢果苷ⅴ Mogroside V 88901-36-4 C60H102O29 1287.44 20mg
32322 連翹苷 Forsythin 487-41-2 C27H34O11 534.55 20mg
32323 連翹酯苷A Forsythoside A 79916-77-1 C29H36O15 624.59 20mg
32324 連翹酯苷B Forsythoside B 81525-13-5 C34H44O19  756.7 20mg
32325 金石蠶苷 Poliumoside 94079-81-9 C35H46O19 770.73 20mg
32326 鄰甲氧基肉桂酸 2-Methoxycinnamic acid 6099-3-2 C10H10O3 178.18 20mg
32327 櫟櫻酸 Roburic acid 6812-81-3 C30H48O2 440.707 20mg
32328 * Alserin 50-55-5 C33H40N2O9 608.68 20mg
32329 諾米林 Nomilin 1063-77-0 C28H34O9 514.56 20mg
32330 遼東楤木皂苷Ⅹ Araloside X C60H98O28 1266 20mg
32331 遼東楤木皂苷Ⅴ Araloside V C54H88O23  1104 20mg
32332 遼東楤木皂苷Ⅶ Araloside VII C54H88O24  1120 20mg
32333 氯化兩面針堿 Nitidine Chloride 13063-04-2 C21H18NO4+ 348.37 20mg
32334 毛兩面針?biāo)?toddalolactone 483-90-9 C16H20O6 308.33 20mg
32335 * Rotundine 10097-84-4 C21H25NO4 355.43 20mg
32336  右旋四氫巴馬汀  D-Tetrahydropalmatine  3520-14-7  C21H25NO4 355.431  20mg
32337 延胡索乙素 Tetrahydropalmatine 6024-85-7 C21H26ClNO4 391.89 20mg
32338 延胡索甲素 Corydaline   518-69-4 C22H27NO4 369.44 20mg
32339 龍腦 （*） Borneol  6627-72-1 C10H18O 154.25 20mg
32340 異龍腦 DL-Isoborneol 124-76-5 C10H18O 154.25 20mg
32341 乙酸龍腦酯 Bornyl acetate
20347-65-3 C12H20O2 196.29 20mg
32342 甜菊糖 Stevioside 57817-89-7 C38H60O18 804.87 20mg
32343 萊苞迪甙A Rebaudioside A 58543-16-1 C44H70O23 967.01 20mg
32344 矢車菊素-3-O-葡萄糖苷 Cyanidin-3-O-glucoside  7084-24-4 C21H21ClO11 484.84 20mg
32345 氯化矢車菊素 Cyanidin Chloride 528-58-5 C15H11ClO6 322.7 5mg
32346 利卡靈-B (-)-Licarin B 51020-87-2 C20H20O4 324.37 20mg
32347 蘿卜硫素（98%） Sulforaphane 4478-93-7 C6H11NOS2 177.29 20mg
32348 絡(luò)石苷 Tracheloside 33464-71-0 C27H34O12 550.2 20mg
32349 輪環(huán)藤堿 Cycleanine 518-94-5 C38H42N2O6 622.75 10mg
32350 靈芝酸 A（96%） Ganoderic acid A 81907-62-2 C30H42O7 514.65 20mg
32351 靈芝酸 B Ganoderic acid B 10mg
32352 藜蘆酸 3,4-Dimethoxybenzoic acid  C9H10O4 CAS 93-07-2
182.17 20mg
32353 3',4',5,6,7,8-六甲氧基黃酮  3’,4’,5,6,7,8-Hexamethoxyflavone
478-01-3
C21H22O8
402.40
20mg
32354 輪環(huán)藤寧 Cyclen 294-90-6 C8H20N4 172.27 20mg
32355 落新婦苷 Astilbin 29838-67-3 C21H22O11 450.4 20mg
32356 莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 C7H10O5 174.15 20mg
32357 * Xylitol 87-99-0 C5H12O5 152.15 20mg
32358 木犀草苷 Cynaroside 5373-11-5 C21H20O11 448.38 20mg
32359 木犀草素 Luteolin 491-70-3 C15H10O6 286.24 20mg
32360 木犀草素-5-O-葡萄糖苷 Luteolin-5-O-glucoside
20344-46-1
C21H20O11 448.39
10mg
32361 馬錢苷 Loganin 1852-94-2 C17H26O10 390.38 20mg
32362 馬錢苷酸 Loganic acid 22255-40-9 C16H24O10 376.36 20mg
32363 蒙花苷 Linarin 480-36-4 C28H32O14 592.55 20mg
32364 麥角甾苷 Verbascoside 61276-17-3 C29H36O15 624.59 20mg
32365 異麥角甾苷 Isoacteoside 61303-13-7 C29H36O15  624.59 20mg
32366 麥角甾醇人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒 Ergosterol 57-87-4 C28H44O 396.65 20mg
32367 3-O-甲基沒(méi)食子酸 3-O-Methylgallic acid  3934-84-7 C8H8O5 184.15 20mg
32368 沒(méi)食子酸甲酯 Methyl gallate 99-24-1 C8H8O5 184.15 20mg
32369 沒(méi)食子酸乙酯 Ethyl gallate 831-61-8 C9H10O5 198.17 20mg
32370 沒(méi)食子酸辛酯 Octyl gallate 1034-01-1 C15H22O5 282.33 20mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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