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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
33883 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA Kit 96T/48T
33884 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒 Human Anti-proteinase 3 antibody IgG,PR3 Ab-IgG ELISA Kit 96T/48T
33885 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit 96T/48T
33886 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 human single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 96T/48T
33887 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒 Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit 96T/48T
33888 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 Human anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit 96T/48T
33889 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒 human anti-nucleosome antibody IgG,AnuA-IgG ELISA Kit 96T/48T
33890 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒 Human anti-scl70 antibody,SCL70/topoⅠELISA Kit 96T/48T
33891 人抗SS-B/La抗體ELISA試劑盒 Human SS-B/La Antibody,ELISA Kit 96T/48T
33892 人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒 Human Pemphigus Foliaceus,PF ELISA Kit 96T/48T
33893 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA試劑盒 Human β2-Glycoprotein 1 antibody IgA,β2-GP1 Ab IgA ELISA Kit 96T/48T
33894 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA試劑盒 Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM,β2-GP1 Ab IgM ELISA Kit 96T/48T
33895 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒 Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG,β2-GP1 Ab IgG ELISA Kit 96T/48T
33896 人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 Human anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit 96T/48T
33897 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 Human anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit 96T/48T
33898 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit 96T/48T
33899 人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒 Human anti-golgi apparatus antibody,AGAA ELISA Kit 96T/48T
33900 人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒 human S100 calcium binding protein A9/calgranulin B,S100A9 ELISA Kit 96T/48T
33901 人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒 human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A,S100A8 ELISA Kit 96T/48T
33902 人前病毒整合位點1(Pim1)ELISA試劑盒 human proviral integration site 1,Pim1 ELISA Kit 96T/48T
33903 人綠膿桿菌外毒素A(PEA)ELISA試劑盒 Human Pseudomonas Exotoxin A,PEA ELISA Kit 96T/48T
33904 人流感病毒A(FLU A)ELISA試劑盒 Human Influenza viruses A,FLU A ELISA Kit 96T/48T
33905 人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒 Human listeriolysin O,LLO ELISA Kit 96T/48T
33906 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒 Human hepatitis B virus X Ag,HBxAg ELISA Kit 96T/48T
33907 人腺相關病毒(AAV)ELISA試劑盒 Human adeno-associated virus,AAV ELISA Kit 96T/48T
33908 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒 Human hepatitis B virus X interacting protein,HBXIP ELISA Kit 96T/48T
33909 人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒 Human Salmonella typhi antigen,St-Ag ELISA Kit 96T/48T
33910 人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human T-lymphotropicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISA Kit 96T/48T
33911 人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒 Human morbillivirus,MV ELISA Kit 96T/48T
33912 人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒 Human epidemic parotitis,EP ELISA Kit 96T/48T
33913 人痢疾內阿米巴抗原ELISA試劑盒 Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit 96T/48T
33914 人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒 Human Lyme IgG ELISA Kit 96T/48T
33915 人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒人環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit 96T/48T
33916 人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 Human chlamydial protease-like activity factor,CPAF ELISA Kit 96T/48T
33917 人脊髓灰質炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒 Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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