人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。
33991 人*結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒 Human Vitamin D-binding protein,DBP ELISA Kit 96T/48T
33992 人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒 Human selenoprotein 1,SEP1 ELISA Kit 96T/48T
33993 人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒 human serum amyloid A3,SAA3 ELISA Kit 96T/48T
33994 人鳥苷酸結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒 human guanylate nucleotide binding protein 4,Gbp4 ELISA Kit 96T/48T
33995 人細(xì)胞色素b561(cytb561)ELISA試劑盒 Human lipocalin 2,LCN2 ELISA Kit 96T/48T
33996 人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒 Human lipocalin 2,LCN2 ELISA Kit 96T/48T
33997 人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒 Human adipocyte fatty acid-binding protein,a-FABP ELISA Kit 96T/48T
33998 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒 Human Glypican-3,GPC-3 ELISA Kit 96T/48T
33999 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒 Human Glucose transporter 3,GLUT3 ELISA Kit 96T/48T
34000 人羥賴氨酸(Hyl)ELISA試劑盒 Human hydroxylysine,Hyl ELISA Kit 96T/48T
34001 人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA試劑盒 Human GTPase activating protein,GAP ELISA Kit 96T/48T
34002 人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA試劑盒 Human glycophosphatidylinositol,GPI ELISA Kit 96T/48T
34003 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒 Human peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit 96T/48T
34004 人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 Human osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit 96T/48T
34005 人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)ELISA試劑盒 Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks,OH-PYD ELISA Kit 96T/48T
34006 人脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒 Human Deoxypyridinoline crosslinks,DPD ELISA Kit 96T/48T
34007 人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒 Human Pyridinoline crosslinks,PYD ELISA Kit 96T/48T
34008 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 Human Staphylococal protein A,SPA ELISA Kit 96T/48T
34009 人刀豆素A(ConA)ELISA試劑盒 Human concanavalin A,ConA ELISA Kit 96T/48T
34010 人游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒 Human Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA Kit 96T/48T
34011 人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 Human lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit 96T/48T
34012 人*過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒 Human Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA Kit 96T/48T
34013 人*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 Human Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit 96T/48T
34014 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒 Human proteolipid protein,PLP ELISA Kit 96T/48T
34015 人垂草扁桃酸(VMA) ELISA試劑盒 Human vanillylmandelic acid,VMA ELISA Kit 96T/48T
34016 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒 Human glucokinase regulatory protein,GKRP ELISA Kit 96T/48T
34017 人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒 Human CTX-2 ELISA Kit 96T/48T
34018 人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒 Human Calretinin,CR ELISA Kit 96T/48T
34019 人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 Human Bone Morphogenetic Protein 6,BMP-6 ELISA Kit 96T/48T
34020 人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒 Human fatty acid-binding protein,FABP ELISA Kit 96T/48T
34021 人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒 Human ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1 ELISA Kit 96T/48T
34022 人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒 Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒96T/48T
34023 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒 Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISA Kit 96T/48T
34024 人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒 Human Arachidonic Acid,AA ELISA Kit 96T/48T
34025 人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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