人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。
34135 人α烯醇化酶(αENOL)ELISA試劑盒 Human α-enolase,αENOL ELISA Kit 96T/48T
34136 人膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 Human Collagenase I ELISA Kit 96T/48T
34137 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 Human phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit 96T/48T
34138 人*羥化酶(TH)ELISA試劑盒 Human tyrosine hydroxylase,TH ELISA Kit 96T/48T
34139 人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 Human dopamine decarboxylase,DDC ELISA Kit 96T/48T
34140 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒 Human non-neuronal enolase,NNE ELISA Kit 96T/48T
34141 人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒 Human dopamine-β-hydroxylase,DBH ELISA Kit 96T/48T
34142 人*乙酰化酶(CHAc)ELISA試劑盒 Human choline acetylase,CHAc ELISA Kit 96T/48T
34143 人異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒 Human isocitrate dehydrogenase,ICD ELISA Kit 96T/48T
34144 人*原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒 Human Trypsinogen-2,Try-ⅡELISA Kit 96T/48T
34145 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒 Human adenosine deaminase,ADA ELISA Kit 96T/48T
34146 人天*氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒 Human Aspartate aminotransferase,AST ELISA Kit 96T/48T
34147 人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒 Human glucose-6-phosphate isomerase,GPI ELISA Kit 96T/48T
34148 人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒 Human Phosphoglucomutase,PGM ELISA Kit 96T/48T
34149 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA試劑盒 Human Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit 96T/48T
34150 人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒 Human Streptokinase,SK ELISA Kit 96T/48T
34151 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA試劑盒 Human Ribonuclease,RNASE ELISA Kit 96T/48T
34152 人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒 Human lipid peroxlde,LPO ELISA Kit 96T/48T
34153 人對(duì)氧磷酶(PON)ELISA試劑盒 Human paraoxonase,PON ELISA Kit 96T/48T
34154 人丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒 Human pyruvate kinase,PK ELISA Kit 96T/48T
34155 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit 96T/48T
34156 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 Human α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 96T/48T
34157 人α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 Human α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit 96T/48T
34158 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit 96T/48T
34159 人L苯*解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 Human L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 96T/48T
34160 人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 Human 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 96T/48T
34161 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Human 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit 96T/48T
34162 人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒 Human targeted ribonuclease, TR ELISA Kit 96T/48T
34163 人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA試劑盒 Human acid sphingomyelinase, ASM ELISA Kit 96T/48T
34164 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒 Human arachidonate 5-lipoxygenase,ALOX-5 ELISA Kit 96T/48T
34165 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 Human 5-lipoxygenase,5-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
34166 人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒 Human adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA Kit 96T/48T
34167 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒(sAC)ELISA試劑盒 Human Soluble Adenylate Cyclase,sAC ELISA Kit 96T/48T
34168 人*脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒 Human Ornithine decarboxylase,ODC ELISA Kit 96T/48T
34169 人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 Human protein tyrosine kinase,PTK ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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