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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
34171 人腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)ELISA試劑盒 Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA Kit 96T/48T
34172 人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒 Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase ELISA Kit 96T/48T
34173 人*型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒 Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA Kit 96T/48T
34174 人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒 Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA ELISA Kit 96T/48T
34175 人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒 Human cathepsin D,cath-D ELISA Kit 96T/48T
34176 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit 96T/48T
34177 人*(PK)ELISA試劑盒 Human pancreatickininogenase,PK ELISA Kit 96T/48T
34178 人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒 Human aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit 96T/48T
34179 人26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒 Human 26S proteasome,26S PSM ELISA Kit 96T/48T
34180 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 ELISA Kit 96T/48T
34181 人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒 Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISA Kit 96T/48T
34182 人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒 Human receptor tyrosine kinase,RTKs ELISA Kit 96T/48T
34183 人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒 Human mitogen activited protein kinase,MAPK ELISA Kit 96T/48T
34184 人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒 Human focal adhesion kinase,FAK ELISA Kit 96T/48T
34185 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA試劑盒 Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA Kit 96T/48T
34186 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
34187 人*酶(Arg)ELISA試劑盒 Human Arginase,Arg ELISA Kit 96T/48T
34188 人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒 Human neutrophilic alkaline phosphatase,NAP ELISA Kit 96T/48T
34189 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒 Human anapastic lymphoma kinase,ALK ELISA Kit 96T/48T
34190 人激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒 Human cytokinin MB,CKMB ELISA Kit 96T/48T
34191 人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒 Human myosin light chain kinase,MLCK ELISA Kit 96T/48T
34192 人*硫轉移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒 Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISA Kit 96T/48T
34193 人*S轉移酶(GSTs)ELISA試劑盒 Human glutathione S-transferases,GSTs ELISA Kit 96T/48T
34194 人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒 Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISA Kit 96T/48T
34195 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒 Human secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit 96T/48T
34196 人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒 Human E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA Kit 96T/48T
34197 人肥大細胞類*(MCT)ELISA試劑盒 Human mast cell tryptase,MCT ELISA Kit 96T/48T
34198 人多巴色素異構酶(DT)ELISA試劑盒 Human dopachrome tautomerase,DT ELISA Kit 96T/48T
34199 人泛素結合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒 Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme,E2/UBCE ELISA Kit 96T/48T
34200 人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒 Human protein disulfide isomerase,PDI ELISA Kit 96T/48T
34201 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒 Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA Kit 96T/48T
34202 人γ谷氨酰半*合成酶(γ-ECS)ELISA試劑盒 Humanγ-glutamyl systeine synthetase,γ-ECS ELISA Kit 96T/48T
34203 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit 96T/48T
34204 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 Human Hexokinase,HK ELISA Kit 96T/48T
34205 人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA試劑盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit 人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒96T/48T
34206 人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒 Human glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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