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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
34387 人不對稱二甲基*(ADMA)ELISA試劑盒 Human asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit 96T/48T
34388 人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒 Human Serotonin,ST ELISA Kit 96T/48T
34389 人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 Human cytotoxin,CTX ELISA Kit 96T/48T
34390 人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒 Human α-Synuclein,α-SYN ELISA Kit 96T/48T
34391 人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒 Human Carbohydrate antigen19-9,CA19-9 ELISA Kit 96T/48T
34392 人水蛭素(HRD)ELISA試劑盒 Human Hirudin,HRD ELISA Kit 96T/48T
34393 人*(FK506)ELISA試劑盒 Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 96T/48T
34394 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 Human epithelial specific antigen,ESA ELISA Kit 96T/48T
34395 人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒 Human Epithelial membrane antigen,EMA ELISA Kit 96T/48T
34396 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA Kit 96T/48T
34397 人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒 Human Anticentromere Antibody,ACA/CENP ELISA Kit 96T/48T
34398 人肌細胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒 Human myogenin,MYOG ELISA Kit 96T/48T
34399 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒 Human antibody to group A streptococcal polysaccharide,ASP ELISA Kit 96T/48T
34400 人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA試劑盒 Human activated protein C resistance,APCR ELISA Kit 96T/48T
34401 人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒 Human N-terminal extein,Ext-N ELISA Kit 96T/48T
34402 人分泌成分(SC)ELISA試劑盒 Human secretory component,SC ELISA Kit 96T/48T
34403 人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒 Human Proteoglycan,PG ELISA Kit 96T/48T
34404 人吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒 Human Pyridinoline,PYD ELISA Kit 96T/48T
34405 人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 96T/48T
34406 人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒 Human Guanine Exchange Factor,GEF ELISA Kit 96T/48T
34407 人*受體(VD R)ELISA試劑盒 Human Vitamin D Receptor,VD R ELISA Kit 96T/48T
34408 人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒 Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA Kit 96T/48T
34409 人金葡菌腸毒素(SE)ELISA試劑盒 Human staphylococcus aureus enterotoxins,SE ELISA Kit 96T/48T
34410 人β細胞素(BTC) ELISA試劑盒 Human beta cellulin,BTC ELISA Kit 96T/48T
34411 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒 Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA Kit 96T/48T
34412 人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒 Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit 96T/48T
34413 人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒 Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit 96T/48T
34414 人抗巨細胞病毒抗體IgM(anti-CMV IgM)ELISA試劑盒 Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit 96T/48T
34415 人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA試劑盒 Human anti-toxoplasma IgG antibody,anti-tox IgG ELISA Kit 96T/48T
34416 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone,N-TSH ELISA Kit 96T/48T
34417 人妊娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 Human Pregnancy Specificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-G ELISA Kit 96T/48T
34418 人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 Human placetal lactogen,PL ELISA Kit 96T/48T
34419 人雄激素結合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 Human Androgen Binding Protein,ABP ELISA Kit 96T/48T
34420 人抗滋養膜細胞抗體(ATA)ELISA試劑盒人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISA Kit 96T/48T
34421 人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 Human anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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