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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
34673 小鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit 96T/48T
34674 小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 96T/48T
34675 小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒 Mouse β-Defensins,β-DF ELISA Kit 96T/48T
34676 小鼠IgG ELISA試劑盒 Mouse IgG ELISA Kit 96T/48T
34677 小鼠IgM ELISA試劑盒 Mouse IgM ELISA Kit 96T/48T
34678 小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 96T/48T
34679 小鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 Mouse anti-red cell antibody ELISA Kit 96T/48T
34680 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒 Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit 96T/48T
34681 小鼠CD19分子(CD19)ELISA試劑盒 Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 96T/48T
34682 小鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 96T/48T
34683 小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit 96T/48T
34684 小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2,AFP-L2 ELISA Kit 96T/48T
34685 小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒 Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1,AFP-L1 ELISA Kit 96T/48T
34686 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 96T/48T
34687 小鼠磷脂酰*(PS)ELISA試劑盒 Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit 96T/48T
34688 小鼠*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒 Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit 96T/48T
34689 小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit 96T/48T
34690 小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 Mouse neurofilament protein,NF ELISA Kit 96T/48T
34691 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒 Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISA Kit 96T/48T
34692 小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 96T/48T
34693 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 Mouse Methemoglobin,MHB ELISA Kit 96T/48T
34694 小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 Mouse C-opeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
34695 小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒 Mouse anti-oligodendrocyte-myelin glycoprotein antibody,OMgp-Ab ELISA Kit 96T/48T
34696 小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit 96T/48T
34697 小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA試劑盒 Mouse keyhole limpet hemocyanin,KLH ELISA Kit 96T/48T
34698 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 96T/48T
34699 小鼠氧化型*(GSGS)ELISA試劑盒 Mouse oxidizided glutathione,GSGS ELISA Kit 96T/48T
34700 小鼠還原型*(GSH)ELISA試劑盒 Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit 96T/48T
34701 小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒 Mouse Troponin T,Tn-T ELISA Kit 96T/48T
34702 小鼠c-fos ELISA試劑盒 Mouse c-fos ELISA Kit 96T/48T
34703 小鼠c-jun ELISA試劑盒 Mouse c-jun ELISA Kit 96T/48T
34704 小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 Mouse anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA Kit 96T/48T
34705 小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 Mouse Mucin-7,MUC7 ELISA Kit 96T/48T
34706 小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒(ECP)ELISA試劑盒 Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 96T/48T
34707 小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒 Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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