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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
35355 大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒 Rat Osteoprotegerin Ligand,OPGL ELISA Kit 96T/48T
35356 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 Rat Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit 96T/48T
35357 大鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 Rat anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit 96T/48T
35358 大鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 Rat ferritin,FE ELISA Kit 96T/48T
35359 大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒 Rat carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA Kit 96T/48T
35360 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 Rat pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit 96T/48T
35361 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 96T/48T
35362 大鼠抗*(AT)ELISA試劑盒 Rat Anti-trypsin,AT ELISA Kit 96T/48T
35363 大鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 Rat islet cell antibody,ICA ELISA Kit 96T/48T
35364 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 Rat Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit 96T/48T
35365 大鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 Rat anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit 96T/48T
35366 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 96T/48T
35367 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit 96T/48T
35368 大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit 96T/48T
35369 大鼠纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 Rat Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 96T/48T
35370 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 Rat plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 96T/48T
35371 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 Rat free fatty acids,FFA ELISA Kit 96T/48T
35372 大鼠血小板反應蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 96T/48T
35373 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 Rat osteonectin,ON ELISA Kit 96T/48T
35374 大鼠*(FA)ELISA試劑盒 Rat Folic acid,FA ELISA Kit 96T/48T
35375 大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 Rat histon-H2b ELISA Kit 96T/48T
35376 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 Rat N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA Kit 96T/48T
35377 大鼠糖皮質類固醇受體(GR)ELISA試劑盒 Rat glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit 96T/48T
35378 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit 96T/48T
35379 大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit 96T/48T
35380 大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit 96T/48T
35381 大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 Rat Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit 96T/48T
35382 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 96T/48T
35383 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 Rat myeloperoxidase,MPO ELISA Kit 96T/48T
35384 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISA Kit 96T/48T
35385 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 Rat granzymes A,Gzms-A ELISA Kit 96T/48T
35386 大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒 Rat lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit 96T/48T
35387 大鼠末端補體復合物人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 Rat terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 96T/48T
35388 大鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 Rat Complement 4,C4 ELISA Kit 96T/48T
35389 大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒 Rat Renin ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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