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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
36039 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Chicken N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit 96T/48T
36040 雞神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 Chicken glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 96T/48T
36041 雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 96T/48T
36042 雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Chicken 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit 96T/48T
36043 雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit 96T/48T
36044 兔雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA Kit 96T/48T
36045 兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒 Rabbit nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit 96T/48T
36046 兔粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 96T/48T
36047 兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Rabbit Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T
36048 兔結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Rabbit Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit 96T/48T
36049 兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 Rabbit α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit 96T/48T
36050 兔子纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒 Rabbit Plasminogen,Plg ELISA Kit 96T/48T
36051 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 Rabbit bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit 96T/48T
36052 兔骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 Rabbit Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 96T/48T
36053 兔胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 Rabbit Amylin ELISA Kit 96T/48T
36054 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit 96T/48T
36055 兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T
36056 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit 96T/48T
36057 兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒 Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit 96T/48T
36058 兔*(LZM)ELISA試劑盒 Rabbit Lysozyme,LZM ELISA Kit 96T/48T
36059 兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒 Rabbit prolactin,PRL ELISA Kit 96T/48T
36060 兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 Rabbit luteotropic hormone,LH ELISA Kit 96T/48T
36061 兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 Rabbit anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit 96T/48T
36062 兔p53(p53)ELISA試劑盒 Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 96T/48T
36063 兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit 96T/48T
36064 兔*(ADR)ELISA試劑盒 Rabbit adramycin,ADR ELISA Kit 96T/48T
36065 兔基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit 96T/48T
36066 兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit 96T/48T
36067 兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 96T/48T
36068 兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
36069 兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒 Rabbit soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA Kit 96T/48T
36070 兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit 人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒96T/48T
36071 兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 Rabbit Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit 96T/48T
36072 兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
36073 兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 Rabbit Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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