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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
36255 蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(vtg)ELISA試劑盒 Nasoniavitripennis vilogenin,Vtg ELISA Kit 96T/48T
36256 紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒 Cherax quadricarinatus lipovilin/vilin,Lv/Vn ELISA Kit 96T/48T
36257 羅氏沼蝦諾達病毒(MrNV)ELISA試劑盒 Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit 96T/48T
36258 α-銀環蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒 α-bungarotoxin,α-BGT ELISA Kit 96T/48T
36259 大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒 Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA Kit 96T/48T
36260 *(AFT)ELISA試劑盒 Aflatoxin,AFT ELISA Kit 96T/48T
36261 蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒 Bacillus thuringiensis,BT ELISA Kit 96T/48T
36262 牛丙酮檢測(acetone)ELISA試劑盒 Bovine acetone ELISA Kit 96T/48T
36263 牛結核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒 Elisa 2*96孔
36264 荷蘭賽迪口蹄疫0型2板ELISA試劑盒 Elisa 2*96孔
36265 豬瘟病毒抗體ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
36266 口蹄疫非結構蛋白抗體ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
36267 豬瘟抗原2板ELISA試劑盒 Elisa 2*96孔
36268 偽狂犬病毒gE2.0抗體ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
36269 藍耳病ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
36270 圓環病毒IgGELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
36271 綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Sheep Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
36272 綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
36273 綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒 Sheep major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit 96T/48T
36274 綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
36275 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 96T/48T
36276 綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit 96T/48T
36277 綿羊補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒 Sheep Complement fragment 3b rccptor,C3bR ELISA Kit 96T/48T
36278 綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit 96T/48T
36279 猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Monkey Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
36280 猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Monkey Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
36281 猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 Monkey Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit 96T/48T
36282 猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 Monkey N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit 96T/48T
36283 猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒 Monkey Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
36284 猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 Monkey β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit 96T/48T
36285 猴B病毒(BV)ELISA試劑盒 Monkey B virus Infections ELISA Kit 96T/48T
36286 猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Monkey apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
36287 猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 Monkey apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
36288 猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Monkey Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
36289 猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Monkey Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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