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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
36757 氯化鈣標準品 Calcium Chloride (AS) 1g 10035-04-8
36758 葡庚糖酸鈣標準品 Calcium Gluceptate 200mg 29039-00-7
36759 氫氧化鈣標準品 Calcium Hydroxide (AS) 1g 1305-62-0
36760 5-羥基吲哚-2-羧酸鈣標準品 ea
36761 *標準品 Calcium Lactate 1g 63690-56-2
36762 乳糖酸鈣標準品 Calcium Lactobionate 200mg 110638-68-1
36763 乙酰丙酸鈣標準品 Calcium Levulinate (AS) 1g 5743-49-7
36764 *標準品 200mg 137-08-6
36765 磷酸三鈣標準品 1g 12167-74-7
36766 糖二酸鈣標準品 Calcium Saccharate 200mg 5793-89-5
36767 硬脂酸鈣標準品 Calcium Stearate (AS) 2g 1592-23-0
36768 樟腦標準品 Camphor 1g 464-49-3
36769 小燭樹蠟標準品 Candelilla Wax 250mg 8006-44-8
36770 *標準品 Candicidin 200mg 1403-17-4
36771 *標準品 Capecitabine 200mg 154361-50-9
36772 *相關物質A標準品 10mg 66335-38-4
36773 *相關物質B標準品 20mg 3094/9/5
36774 正辛酸標準品 Caprylic Acid 300mg 124-07-2
36775 *標準品 Capsaicin 100mg 404-86-4
36776 *標準品 Captopril 200mg 62571-86-2
36777 *二硫化物標準品 Captopril Disulfide 100mg 64806-05-9
36778 辛酰己酰聚氧甘油酯標準品 200mg
36779 卡巴*標準品 Carbachol 200mg 51-83-2
36780 *標準品 100mg 298-46-4
36781 *相關物質A標準品 50mg 3564-73-6
36782 *相關物質B標準品 50mg 256-96-2
36783 卡巴胂標準品 Carbarsone 200mg 121-59-5
36784 *茚滿鈉標準品 Carbenicillin Indanyl Sodium 300mg 26605-69-6
36785 一水合*鈉標準品 200mg
36786 *標準品 Carbidopa 400mg 38821-49-7
36787 *相關物質A標準品 25mg 85933-17-3
36788 馬來酸卡比沙明標準品 Carbinoxamine Maleate 200mg 3505-38-2
36789 *標準品 Carboplatin 100mg 41575-94-4
36790 卡前列素*標準品 Carboprost Tromethamine 25mg 58551-69-2
36791 羧甲基纖維素鈣標準品 1.5g 9050/4/8
36792 羧甲基纖維素鈉標準品 Carboxymethylcellulose Sodium 1.5g 9004-32-4
36793 卡立普多標準品 Carisoprodol 1g 78-44-4
36794 羧甲基纖維素標準品 Carmellose 500mg 9000/11/7
36795 *標準品 Carvedilol 200mg 72956-09-3
36796 *相關物質A標準品 15mg
36797 *相關物質B標準品 15mg 918903-20-5
36798 *相關物質C標準品 20mg 72955-94-3
36799 *相關物質D標準品 15mg 51997-51-4
36800 *相關物質E標準品 15mg 1836-62-0
36801 *系統適應性混合物標準品 25mg
36802 卡洛芬標準品 Carprofen人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒 200mg 53716-49-7
36803 卡洛芬相關物質A標準品 Carprofen Related Compound A 50mg 86-74-8
36804 *標準品 75mg
36805 *相關物質A標準品 Carmustine Related Compound A 10mg 2214-72-4
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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