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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
36957 鹽酸*棕櫚酯標準品 500mg 25507-04-4
36958 *磷酸酯標準品 Clindamycin Phosphate 250mg 24729-96-2
36959 *標準品 Clioquinol 500mg 130-26-7
36960 *標準品 Clobetasol Propionate 200mg 25122-46-7
36961 *相關物質A標準品 50mg
36962 匹伐氯可托龍標準品 Clocortolone Pivalate 200mg 34097-16-0
36963 *標準品 Clofazimine 200mg 2030-63-9
36964 *標準品 Clofibrate 1g 637-07-0
36965 枸櫞酸氯米芬標準品 Clomiphene Citrate 500mg 50-41-9
36966 氯米芬相關雜質A標準品 100mg 74056-26-1
36967 氯丙咪嗪標準品 Clomipramine Hydrochloride 200mg 17321-77-6
36968 氯*標準品 Clonazepam CIV 200mg 1622-61-3
36969 氯*相關雜質A標準品 25mg 55198-89-5
36970 氯*相關雜質B標準品 Clonazepam Related Compound B 25mg 2011-66-7
36971 氯*相關雜質C標準品 Clonazepam Related Compound C 25mg 52130-87-7
36972 可樂定標準品 Clonidine 200mg 4205-90-7
36973 *標準品 Clonidine Hydrochloride 200mg 4205-91-8
36974 可樂定相關雜質A標準品 Clonidine Related Compound A 25mg 54707-71-0
36975 可樂定雜質B標準品 25mg
36976 氯革酸鉀標準品 Clorazepate Dipotassium CIV 125mg 57109-90-7
36977 *相關雜質A標準品 20mg 144750-42-5
36978 *相關雜質B標準品 20mg 144750-52-7
36979 *相關雜質C標準品 20mg 120202-71-3
36980 氯前列烯醇鈉標準品 Cloprostenol Sodium 400mg 55028-72-3
36981 氯舒隆標準品 Clorsulon 200mg 60200-06-8
36982 *標準品 Clotrimazole 200mg 23593-75-1
36983 *相關雜質A標準品 25mg 66774-02-5
36984 芐星鄰氯*標準品 Cloxacillin Benzathine 200mg 23736-58-5
36985 *鈉標準品 Cloxacillin Sodium 200mg 7081-44-9
36986 *標準品 Clozapine 100mg 5786-21-0
36987 *分離度用混合物標準品 Clozapine Resolution Mixture 30mg 5786-21-0
36988 古柯堿標準品 Cocaine Hydrochloride CII 250mg 53-21-4
36989 可待因N-氧化物標準品 Codeine N-Oxide CI 50mg 3688-65-1
36990 *、D標準品 Cod Liver Oil 1g 8001-69-2
36991 秋水仙素標準品 Colchicine 350mg 64-86-8
36992 鹽酸考來替泊標準品 Colestipol Hydrochloride 200mg 37296-80-3
36993 *甲磺酸鈉標準品 Colistimethate Sodium 200mg 8068-28-8
36994 玉米油標準品 Corn Oil (AS) 1g 8001-30-7
36995 促腎上腺皮質激素標準品 Corticotropin 5 vails 9002-60-2
36996 *標準品 Cortisone Acetate 150mg 1950/4/4
36997 棉籽油標準品 Cottonseed Oil (AS) 1g 8001-29-4
36998 肌酸酐標準品 Creatinine 100mg 60-27-5
36999 *標準品 Cromolyn Sodium 500mg 15826-37-6
37000 *相關物質A標準品 25mg 16150-44-0
37001 交聯聚維酮對照品標準品 Crospovidone 100mg 9003-39-8
37002 *標準品 Crotamiton 200mg 483-63-6
37003 異丙苯標準品人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 Cumene 1.2ml×3ampules 98-82-8
37004 姜黃素標準品 Curcumin 30mg 458-37-7
37005 類姜黃素標準品 Curcuminoids 300mg
37006 氯化花青素標準品 Cyanidin Chloride 25mg 528-58-5
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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