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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人*(VD)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人*(VD)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*(VD)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
37359 5-*標準品 Flucytosine 200mg 2022-85-7
37360 *標準品 Fludarabine Phosphate 300mg 75607-67-9
37361 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖標準品 Fludeoxyglucose 100mg 29702-43-0
37362
2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖相關物質A標準品
15mg 23978-09-8
37363 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖相關物質B標準品 10mg 14685-79-1
37364 *標準品 Fludrocortisone Acetate 250mg 514-36-3
37365 *標準品 Flumazenil 200mg 78755-81-4
37366 *相關物質A標準品 20mg
37367 *相關物質B標準品 Flumazenil Related Compound B 20mg
37368 *相關物質C標準品 Flumazenil Related Compound C 500mg 1188-33-6
37369 雙*叔戊酸酯標準品 Flumethasone Pivalate 200mg 2002-29-1
37370 氟尼縮松標準品 Flunisolide 200mg 77326-96-6
37371 氟尼辛*標準品 Flunixin Meglumine 300mg 42461-84-7
37372 醋酸膚輕松標準品 Fluocinolone Acetonide 100mg 67-73-2
37373 *標準品 Fluocinonide 100mg 356-12-7
37374 熒光素標準品 Fluorescein 200mg 2321/7/5
37375 氟化牙粉:氟化鈉/二氧化硅標準品 4.5oz
37376 氟化牙粉:氟化鈉/*粉標準品 4oz
37377 氟化牙粉:單氟磷酸鈉-碳酸鈣標準品 4.6oz
37378 氟化牙粉:單氟磷酸鈉/*標準品 4.6oz
37379
氟化牙粉:單氟磷酸鈉(1000 ppm)/二氧化硅標準品
5.25oz
37380 氟化牙粉:單氟磷酸鈉(1500 ppm)/二氧化硅標準品 5.25oz
37381 氟化牙粉:氟化亞錫-二氧化硅標準品 4oz
37382 *標準品 Fluorometholone 200mg 426-13-1
37383 *醋酸酯標準品 Fluorometholone Acetate 200mg 3801/6/7
37384 環丙羧酸標準品 Fluoroquinolonic Acid 150mg 86393-33-1
37385 鹽酸*標準品 Fluoxetine Hydrochloride 200mg 56296-78-7
37386 *相關物質A標準品 15mg 79088-29-2
37387 *相關物質B標準品 5ml
37388 *相關物質C標準品 15mg
37389 氟*標準品 Fluoxymesterone CIII 200mg 76-43-7
37390 癸氟*標準品 500mg 5002-47-1
37391 鹽酸氟*庚酸酯標準品 125mg 3105-68-8
37392 鹽酸氟*標準品 Fluphenazine Hydrochloride 125mg 146-56-5
37393 甲酸標準品 Formic Acid 1.2ml×3ampules 64-18-6
37394 佛司可林標準品 Forskolin 40mg 66575-29-9
37395 弗司可林粉末提取物標準品 Powdered Forskohlii Extract 500mg
37396 *標準品 Foscarnet Sodium 50mg 34156-56-4
37397 膦甲酸相關物質B標準品 10mg
37398 膦甲酸相關物質D標準品 Foscarnet Related Compound D 0.27ml 1474-78-8
37399 *標準品 Fosinopril Sodium 200mg 88889-14-9
37400 福辛普利相關物質A標準品 25mg 95399-71-6
37401 福辛普利相關物質B標準品 15mg
37402 福辛普利相關物質C標準品 15mg
37403 福辛普利相關物質D標準品 15mg
37404 福辛普利相關物質E標準品人*(VD)ELISA試劑盒 15mg
37405 福辛普利相關物質F標準品 15mg
37406 福辛普利相關物質G標準品 15mg
37407 福辛普利相關物質H標準品 25mg 46348-61-2
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人*(VD)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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