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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
37859 苯磺酸美索達嗪標準品 Mesoridazine Besylate 250mg 32672-69-8
37860 *甲醚標準品 Mestranol 200mg 72-33-3
37861 間甲酚 1ml
37862 鹽酸*標準品 Metformin Hydrochloride 200mg 1115-70-4
37863 鹽酸*相關物質A標準品 30mg 461-58-5
37864 鹽酸*相關物質B標準品 25mg 1396331
37865 鹽酸*相關物質C標準品 25mg 1985-46-2
37866 氯化乙酰甲*標準品 Methacholine Chloride (AS) 500mg 62-51-1
37867 甲基丙烯酸共聚物A型標準品 200mg 25086-15-1
37868 甲基丙烯酸共聚物B型標準品 200mg 25086-15-1
37869 甲基丙烯酸共聚物C型標準品 200mg 25086-15-1
37870 美他環素鹽酸鹽標準品 Methacycline Hydrochloride 200mg 3963-95-9
37871 溴甲胺太林標準品 Methantheline Bromide 200mg 53-46-3
37872 富馬酸噻吡二胺標準品 Methapyrilene Fumarate 200mg 33032-12-1
37873 美沙比妥標準品 Metharbital CIII 200mg 1950/11/3
37874 甲氮酰胺標準品 Methazolamide 500mg 554-57-4
37875 鹽酸甲吡吩嗪標準品 Methdilazine Hydrochloride 200mg 1229-35-2
37876 *標準品 Methenamine 500mg 100-97-0
37877 馬尿酸*標準品 Methenamine Hippurate 200mg 5714-73-8
37878 扁桃酸*標準品 Methenamine Mandelate 200mg 587-23-5
37879 *鈉標準品 Methicillin Sodium (AS) 500mg 7246-14-2
37880 甲硫咪唑標準品 Methimazole 200mg 60-56-0
37881 L-*標準品 L-Methionine 200mg 63-68-3
37882 *標準品 Methocarbamol 200mg 532-03-6
37883 美索比妥標準品 Methohexital CIV 500mg 18652-93-2
37884 *標準品 Methotrexate 500mg 1959/5/2
37885 *相關物質B標準品 75mg 54-62-6
37886 *相關物質C標準品 50mg 2410-93-7
37887 *相關物質E標準品 50mg 70844-48-3
37888 左美丙嗪標準品 Methotrimeprazine 200mg 60-99-1
37889 *標準品 Methoxamine Hydrochloride 200mg 61-16-5
37890 *標準品 Methoxsalen 500mg 298-81-7
37891 甲氧氟烷標準品 Methoxyflurane 1ml 76-38-0
37892 甲氧基甲基*標準品 Methoxymethylguanine 20mg
37893 3-甲氧基*標準品 50mg 7636-26-2
37894 *標準品 Methscopolamine Bromide 200mg 155-41-9
37895 甲琥胺標準品 Methsuximide 500mg 77-41-8
37896 *標準品 Methyclothiazide 200mg 135-07-9
37897 *相關物質A標準品 100mg
37898 乙酸甲酯標準品 Methyl Acetate 1.2ml×3ampules 79-20-9
37899 甲醇標準品 Methyl Alcohol 3x1.5ml 67-56-1
37900 3-甲基-丁醇標準品 3-Methyl-1-butanol 1.2ml×3ampules 123-51-3
37901 氯化芐乙氧銨標準品 Methylbenzethonium Chloride 500mg 25155-18-4
37902 甲基亞芐亞基樟腦標準品 Methyl Benzylidene Camphor 200mg 36861-47-9
37903 癸酸甲酯標準品 Methyl Caprate 300mg 110-42-9
37904 己酸甲酯標準品人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒 Methyl Caproate 300mg 106-70-7
37905 辛酸甲酯標準品 Methyl Caprylate 300mg 111-11-5
37906 甲基纖維素標準品 Methylcellulose (AS) 1g 9004-67-5
37907 *標準品 Methyldopa 500mg 41372-08-1
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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