人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

39289 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Natamycin  200mg 7681-93-8 
39290 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Terfenadine Related Compound A 100mg 76815-60-6 
39291 氟化鈉標(biāo)準(zhǔn)品 1g 7681-49-4 
39292 非索非那定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 76811-98-8 
39293 *龍醋酸特丁酯標(biāo)準(zhǔn)品 Prednisolone Tebutate 200mg 7681-14-3 
39294 *標(biāo)準(zhǔn)品 Potassium Iodide (AS) 1g 7681-11-0 
39295 *相關(guān)化合物B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 76801-93-9 
39296 碘氟醇相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 76801-93-9 
39297 戊硫代*標(biāo)準(zhǔn)品 Thiopental CIII 250mg 76-75-5 
39298 戊*標(biāo)準(zhǔn)品 Pentobarbital CII 200mg 76-74-4 
39299 司可*標(biāo)準(zhǔn)品 Secobarbital CII 200mg 76-73-3 
39300 磷酸標(biāo)準(zhǔn)品 Phosphoric Acid (AS) 1.5ml×3ampules 7664-38-2 
39301 雙*標(biāo)準(zhǔn)品 Divalproex Sodium 200mg 76584-70-8
39302 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Bromide 1g 7647-15-6 
39303 氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Chloride (AS) 1g 7647-14-5 
39304 L-阿拉伯糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 L-Arabinitol 500mg 7643-75-6
39305 氟*標(biāo)準(zhǔn)品 Fluoxymesterone CIII 200mg 76-43-7 
39306 *標(biāo)準(zhǔn)品 Oxycodone CII 200mg 76-42-6 
39307 羥*酮標(biāo)準(zhǔn)品 Oxymorphone CII 500mg 76-41-5 
39308 甲氧氟烷標(biāo)準(zhǔn)品 Methoxyflurane 1ml 76-38-0 
39309 3-甲氧基*標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 7636-26-2 
39310 碘普羅胺相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 76350-28-2 
39311 鹽酸卡西酮標(biāo)準(zhǔn)品 Cathinone Hydrochloride CI 50mg 76333-53-4
39312 *標(biāo)準(zhǔn)品 Triamcinolone Acetonide 500mg 76-25-5 
39313 克利溴銨標(biāo)準(zhǔn)品 Clidinium Bromide 500mg 76201-95-1
39314 *標(biāo)準(zhǔn)品 Enalapril Maleate 200mg 76095-16-4
39315 β-環(huán)糊精標(biāo)準(zhǔn)品 Beta Cyclodextrin 250mg 7585-39-9
39316 利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 75755-10-1
39317 *標(biāo)準(zhǔn)品 Cefmenoxime Hydrochloride 350mg 75738-58-8
39318 *標(biāo)準(zhǔn)品 Leflunomide 200mg 75706-12-6 
39319 依拉地平標(biāo)準(zhǔn)品 Isradipine  200mg 75695-93-1 
39320 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fludarabine Phosphate  300mg 75607-67-9 
39321 二類殘留溶劑-硝基甲烷標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules 75-52-5 (Nit... 
39322 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 754926-25-5 
39323 一類殘留溶劑-1,1-二氯乙烯標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules 75-35-4 
39324 *標(biāo)準(zhǔn)品 Lovastatin  125mg 75330-75-5 
39325 溴哌利多癸酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Bromperidol Decanoate 15mg 75067-66-2
39326 *標(biāo)準(zhǔn)品 Magaldrate  200mg 74978-16-8 
39327 半乳糖二酸異美汀標(biāo)準(zhǔn)品 Isometheptene Mucate  200mg 7492-31-1 
39328  
1,2-二(2-乙基己基氧碳基)乙烷磺酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 
Docusate Potassium 100mg 7491-09-0
39329 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 748812-53-5 
39330 扎西他濱標(biāo)準(zhǔn)品 Zalcitabine 200mg 7481-89-2 
39331 扎西他濱相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Zalcitabine Related Compound A 50mg 7481-88-1 
39332 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Arginine 200mg 74-79-3
39333 *標(biāo)準(zhǔn)品 Alprostadil 25mg 745-65-3
39334 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Prilocaine Related Compound B 50mg 744961-76-0 
39335 氯化鉀標(biāo)準(zhǔn)品 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒Potassium Chloride (AS) 1g 7447-40-7 
39336 *一水合物標(biāo)準(zhǔn)品 Imipenem Monohydrate  100mg 74431-23-5 
39337 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 74381-53-6 
39338 依替膦酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Etidronate Disodium 200mg 7414-83-7

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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