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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
39639 酒石酸鈉標準品 Sodium Tartrate Dihydrate 500mg×4vials 6106-24-7
39640 左美丙嗪標準品 Methotrimeprazine 200mg 60-99-1
39641 頭孢雷特標準品 Ceforanide 200mg 60925-61-3
39642 半乳糖醇標準品 Galactitol 500mg 608-66-2
39643 *標準品 Antipyrine 200mg 60-80-0
39644 *相關物質A標準品 25mg 60729-91-1
39645 *標準品 Amrinone 500mg 60719-84-8
39646 *標準品 Iodipamide 200mg 606-17-7
39647 甲硫咪唑標準品 Methimazole 200mg 60-56-0
39648 *標準品 Oxazepam CIV 200mg 604-75-1
39649 *標準品 Bisacodyl 125mg 603-50-9
39650 *標準品 Aminocaproic Acid 200mg 60-32-2
39651 氯化乙酰*標準品 Acetylcholine Chloride 200mg 60-31-1
39652 肌酸酐標準品 Creatinine 100mg 60-27-5
39653 氯舒隆標準品 Clorsulon 200mg 60200-06-8
39654 L-*標準品 L-Tyrosine 500mg 60-18-4
39655 *相關物質A標準品 50mg 60166-98-5
39656 *標準品 Iopamidol 200mg 60166-93-0
39657 *標準品 Gabapentin 250mg 60142-96-3
39658 一水合*標準品 Morphine Monohydrate CII (AS) 50mg 6009-81-0
39659 *標準品 Cetylpyridinium Chloride 500mg 6004-24-6
39660 三氯叔丁醇標準品 Chlorobutanol 200mg 6001-64-5
39661 乙二胺四乙酸標準品 Edetic Acid 200mg 60-00-4
39662 *標準品 Sulfasalazine 125mg 599-79-1
39663 苯甲唑啉鹽酸鹽標準品 Tolazoline Hydrochloride 300mg 59-97-2
39664 多巴標準品 Levodopa 200mg 59-92-7
39665 泛酯標準品 Pantolactone 500mg 599-04-2
39666 乳糖一水標準品 Lactose Monohydrate 500mg 5989-81-1
39667 *標準品 Benoxinate Hydrochloride 200mg 5987-82-6
39668 *標準品 Nitrofurazone 200mg 59-87-0
39669 環孢菌素標準品 Cyclosporine 50mg 59865-13-3
39670 酒石酸啡諾標準品 Levorphanol Tartrate CII 500mg 5985-38-6
39671 *標準品 Niacin 200mg 59-67-6
39672 *標準品 Acetazolamide 2g 59-66-5
39673 *標準品 Dihydrocodeine Bitartrate CII 200mg 5965-13-9
39674 甘羅溴銨甘羅溴銨標準品 Glycopyrrolate 200mg 596-51-0
39675 異卡波肼標準品 Isocarboxazid 200mg 59-63-2
39676 二乙酸熒光素標準品 Diacetylfluorescein 200mg 596-09-8
39677 *標準品 Megestrol Acetate 500mg 595-33-5
39678 消旋蛋氨酸標準品 Racemethionine 200mg 59-51-8
39679 鹽酸*標準品 200mg 59467-96-8
39680 *標準品 Midazolam CIV 300mg 59467-70-8
39681 磺胺喹喔啉標準品 Sulfaquinoxaline 200mg 59-40-5
39682 馬來酸吡拉明標準品 Pyrilamine Maleate 200mg 59-33-6
39683 *標準品人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒 500mg 59-30-3
39684 *標準品 Acyclovir 300mg 59277-89-3
39685 二類殘留溶劑-甲氧丁基酮標準品 1.2ml×3ampules 591-78-6 (Me...
39686 間氨基*標準品 m-Aminophenol 300mg 591-27-5
39687 *標準品 Misoprostol 100mg 59122-46-2
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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