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人纖溶酶原（Plg）ELISA試劑盒

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更新時(shí)間：2017-03-14 13:09:42瀏覽次數(shù)：127次

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人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

39639 酒石酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Tartrate Dihydrate 500mg×4vials 6106-24-7
39640 左美丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Methotrimeprazine 200mg 60-99-1
39641 頭孢雷特標(biāo)準(zhǔn)品 Ceforanide 200mg 60925-61-3
39642 半乳糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 Galactitol 500mg 608-66-2
39643 *標(biāo)準(zhǔn)品 Antipyrine 200mg 60-80-0
39644 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 60729-91-1
39645 *標(biāo)準(zhǔn)品 Amrinone 500mg 60719-84-8
39646 *標(biāo)準(zhǔn)品 Iodipamide 200mg 606-17-7
39647 甲硫咪唑標(biāo)準(zhǔn)品 Methimazole 200mg 60-56-0
39648 *標(biāo)準(zhǔn)品 Oxazepam CIV 200mg 604-75-1
39649 *標(biāo)準(zhǔn)品 Bisacodyl 125mg 603-50-9
39650 *標(biāo)準(zhǔn)品 Aminocaproic Acid 200mg 60-32-2
39651 氯化乙酰*標(biāo)準(zhǔn)品 Acetylcholine Chloride 200mg 60-31-1
39652 肌酸酐標(biāo)準(zhǔn)品 Creatinine 100mg 60-27-5
39653 氯舒隆標(biāo)準(zhǔn)品 Clorsulon 200mg 60200-06-8
39654 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Tyrosine 500mg 60-18-4
39655 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 60166-98-5
39656 *標(biāo)準(zhǔn)品 Iopamidol 200mg 60166-93-0
39657 *標(biāo)準(zhǔn)品 Gabapentin 250mg 60142-96-3
39658 一水合*標(biāo)準(zhǔn)品 Morphine Monohydrate CII (AS) 50mg 6009-81-0
39659 *標(biāo)準(zhǔn)品 Cetylpyridinium Chloride 500mg 6004-24-6
39660 三氯叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)品 Chlorobutanol 200mg 6001-64-5
39661 乙二胺四乙酸標(biāo)準(zhǔn)品 Edetic Acid 200mg 60-00-4
39662 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfasalazine 125mg 599-79-1
39663 苯甲唑啉鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Tolazoline Hydrochloride 300mg 59-97-2
39664 多巴標(biāo)準(zhǔn)品 Levodopa 200mg 59-92-7
39665 泛酯標(biāo)準(zhǔn)品 Pantolactone 500mg 599-04-2
39666 乳糖一水標(biāo)準(zhǔn)品 Lactose Monohydrate 500mg 5989-81-1
39667 *標(biāo)準(zhǔn)品 Benoxinate Hydrochloride 200mg 5987-82-6
39668 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nitrofurazone 200mg 59-87-0
39669 環(huán)孢菌素標(biāo)準(zhǔn)品 Cyclosporine 50mg 59865-13-3
39670 酒石酸啡諾標(biāo)準(zhǔn)品 Levorphanol Tartrate CII 500mg 5985-38-6
39671 *標(biāo)準(zhǔn)品 Niacin 200mg 59-67-6
39672 *標(biāo)準(zhǔn)品 Acetazolamide 2g 59-66-5
39673 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydrocodeine Bitartrate CII 200mg 5965-13-9
39674 甘羅溴銨甘羅溴銨標(biāo)準(zhǔn)品 Glycopyrrolate 200mg 596-51-0
39675 異卡波肼標(biāo)準(zhǔn)品 Isocarboxazid 200mg 59-63-2
39676 二乙酸熒光素標(biāo)準(zhǔn)品 Diacetylfluorescein 200mg 596-09-8
39677 *標(biāo)準(zhǔn)品 Megestrol Acetate 500mg 595-33-5
39678 消旋蛋氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 Racemethionine 200mg 59-51-8
39679 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 59467-96-8
39680 *標(biāo)準(zhǔn)品 Midazolam CIV 300mg 59467-70-8
39681 磺胺喹喔啉標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfaquinoxaline 200mg 59-40-5
39682 馬來(lái)酸吡拉明標(biāo)準(zhǔn)品 Pyrilamine Maleate 200mg 59-33-6
39683 *標(biāo)準(zhǔn)品人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒 500mg 59-30-3
39684 *標(biāo)準(zhǔn)品 Acyclovir 300mg 59277-89-3
39685 二類(lèi)殘留溶劑-甲氧丁基酮標(biāo)準(zhǔn)品 1.2ml×3ampules 591-78-6 (Me...
39686 間氨基*標(biāo)準(zhǔn)品 m-Aminophenol 300mg 591-27-5
39687 *標(biāo)準(zhǔn)品 Misoprostol 100mg 59122-46-2

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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