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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-18 11:20:46瀏覽次數(shù):105次
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人補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
39839 覆盆子酮標準品 100mg 5471-51-2
39840 可樂定相關雜質A標準品 Clonidine Related Compound A 25mg 54707-71-0
39841 碳酸鎂標準品 Magnesium Carbonate (AS) 2g 546-93-0
39842 乙酰氧肟酸標準品 Acetohydroxamic Acid 200mg 546-88-3
39843 奧西諾酯標準品 500mg 5466-77-3
39844 硫柳汞鈉標準品 Thimerosal 500mg 54-64-8
39845 *相關物質D標準品 Lorazepam Related Compound D 25mg 54643-79-7
39846 *相關物質B標準品 75mg 54-62-6
39847 肉豆蔻酸標準品 Myristic Acid 200mg 544-63-8
39848 *標準品 Idoxuridine 250mg 54-42-2
39849 美替拉酮標準品 Metyrapone 200mg 54-36-4
39850 *相關物質B標準品 20mg 54350-48-0
39851 *標準品 Furosemide 200mg 54-31-9
39852 *標準品 Sodium Salicylate 500mg 54-21-7
39853 *相關物質A標準品 50mg 54197-66-9
39854 醋酸氟卡尼標準品 Flecainide Acetate 200mg 54143-56-5
39855 溴化十烴季胺標準品 Decamethonium Bromide 250mg 541-22-0
39856 *標準品 Levocarnitine 400mg 541-15-1
39857 鹽酸*標準品 200mg 5411-22-3
39858 二類殘留溶劑-1,2-二氯乙烯標準品 1.2ml×3ampules 540-59-0 (1,...
39859 去氧孕烯相關物質C標準品 25mg 54048-10-1
39860 去氧孕烯標準品 Desogestrel 50mg 54024-22-5
39861 棕櫚酸棕櫚酯標準品 Cetyl Palmitate 50mg 540-10-3
39862 *相關物質B標準品 50mg 53990-51-5
39863 *相關物質A標準品 Sulindac Related Compound A 20mg 53933-60-1
39864 替扎尼定相關物質C標準品 50mg 5391-52-6
39865 *標準品 Indomethacin 200mg 53-86-1
39866 N-乙酰-L-*標準品 N-Acetyl-L-Tyrosine 100mg 537-55-3
39867 *標準品 Fenoprofen Calcium 500mg 53746-45-5
39868 奧酚噠唑標準品 Oxfendazole 200mg 53716-50-0
39869 卡洛芬標準品 Carprofen 200mg 53716-49-7
39870 *標準品 Dyclonine Hydrochloride 200mg 536-43-6
39871 *標準品 Ethionamide 200mg 536-33-4
39872 鹽酸丙嗪標準品 Promazine Hydrochloride 200mg 53-60-1
39873 溴甲胺太林標準品 Methantheline Bromide 200mg 53-46-3
39874 氧雄龍標準品 Oxandrolone CIII 50mg 53-39-4
39875 *醋酸酯標準品 Methylprednisolone Acetate 200mg 53-36-1
39876 辛基十二烷醇標準品 Octyldodecanol 200mg 5333-42-6
39877 鹽酸海克卡因標準品 Hexylcaine Hydrochloride 1g 532-76-3
39878 *標準品 Sodium Benzoate 1g 532-32-1
39879 古柯堿標準品 Cocaine Hydrochloride CII 250mg 53-21-4
39880 *標準品 Methocarbamol 200mg 532-03-6
39881 米托擔標準品 Mitotane 500mg 53-19-0
39882 雌酚酮標準品 Estrone 200mg 53-16-7
39883 鹽標準品人補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 50mg 53152-21-9
39884 N-乙基哌嗪標準品 N-Ethylpiperazine 0.5ml 5308-25-8
39885 *棕櫚酸酯標準品 Chloramphenicol Palmitate 200mg 530-43-8
39886 無味*A晶型標準品 200mg 530-43-8
39887 *A多晶型標準品 100mg 530-43-8
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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