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人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白（β-Cat）ELISA試劑盒

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人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

41779 丁溴酸東莨菪堿 Scopolamine butylbromide *堿; 溴丁東莨菪堿 20mg/支 149-64-4
41780 山茱萸苷
41781 莫諾苷 Morroniside 20mg/支 25406-64-8
41782 (R型)人參皂苷Rg2 20(R)Ginsenoside Rg2 20(R)人參皂苷Rg2 20mg/支分子式：  C42H72O13
分子量：  784
41783 商陸皂苷甲 20mg/支分子式:C42H72O13
分子量：  784
41784 白當(dāng)歸腦 Byakangelicol 20mg/支 26091-79-2
41785 新*二氫查爾酮 Neosperidin dihydrochalcone 20mg/支 20702-77-6
41786 馬錢苷酸 Loganic acid 馬錢酸; 落干酸 20mg/支 22255-40-9
41787 仙鶴草酚B Agrimol B 10mg/支 55576-66-4
41788 升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷 Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside 10mg/支分子式：  C35H56O9
分子量：  620.81
41789 牡荊素鼠李糖苷 vitexin-2″-o-rhamnoside 20mg/支 64820-99-1
41790 牡荊素 Vitexin 5, 7, 4’-三羥基黃酮-8-C-β-D-葡萄糖苷 20mg/支 3681-93-4
41791 20(R)* 20(R)Ginsenoside Rg3 20mg/支
41792 20(R)原人參三醇 20(R)Protopanaxatriol 20mg/支分子式：  C30H52O4
分子量：  476
41793 *甲
41794 *乙
41795 蔓荊子黃素 Vitexicarpin 紫花牡荊素 20mg/支 479-91-4
41796 龍血素B
41797 原蘇木素B Protosappanin B 原巴西蘇木素 10mg/支 102036-29-3
41798 辛夷脂素
41799 *醚內(nèi)酯 Linderane 20mg/支 13476-25-0
41800 漆黃素 Fisetin 非瑟酮；紫鉚素；非瑟素 20mg/支 528-48-3
41801 苦玄參苷IA
41802 蘆薈苷 Aloin 蘆薈甙；蘆薈大黃素甙 20mg/支 1415-73-2
41803 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ Atractylenolide I 蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅰ 20mg/支 73069-13-3
41804 白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ 蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅱ
41805 白術(shù)內(nèi)酯III Atractylenolide III 蒼術(shù)內(nèi)酯III 20mg/支 73030-71-4
41806 蟾毒靈
41807 根皮素 Phloretin 20mg/支 60-82-2
41808 * Bilirubin 20mg/支 635-65-4
41809 大葉茜草素
41810 羥基*A Hydroxysafflor yellow A 20mg/支 78281-02-4
41811 槐角堿
41812 胡蘆巴堿
41813 * Daphnetin 祖師麻甲素 20mg/支 207-632-8
41814 小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 20mg/支 20554-84-1
41815 重樓皂苷I Polyphyllin I 重樓皂甙I 20mg/支 50773-41-6
41816 重樓皂苷II Polyphyllin II 重樓皂甙II 20mg/支 76296-72-5
41817 鼠尾草酚 Carnosol 鼠尾草苦內(nèi)脂 20mg/支 5957-80-2
41818 重樓皂苷VI Polyphyllin VI 重樓皂甙VI 20mg/支 55916-51-3
41819 重樓皂苷VII Polyphyllin VII 重樓皂苷VII 20mg/支 76296-75-8
41820 烏金苷烏金甙 20mg/支
41821 獐牙菜苷 Sweroside 獐牙菜苷; 當(dāng)藥苷 20mg/支 14215-86-2
41822 豆腐果苷 Helicid 豆腐果甙；* 20mg/支 80154-34-3
41823 * (?)-Huperzine A 20mg/支 102518-79-6
41824 川陳皮素 Nobiletin 川皮亭;蜜橘黃素 20mg/支 478-01-3
41825 告達(dá)亭苷元告達(dá)亭甙元 20mg/支
41826 青陽(yáng)參苷元A Qingyangshengenin A 青陽(yáng)參甙元A 20mg/支
41827 青陽(yáng)參苷元B Qingyangshengenin B 青陽(yáng)參甙元B 20mg/支
41828 補(bǔ)骨脂酚 Bakuchiol 此產(chǎn)品為液體 20mg/支 10309-37-2
41829 圣草素-7-0-葡萄糖甙
41830 圣草酚 Eriodictyol 552-58-9
41831 * Bulleyaconitine A 20mg/支 107668-79-1
41832 L-4-羥基異*
41833 亞麻木酚素 Secoisolariciresinol Diglucoside 亞麻木酯素; 亞麻木脂素 20mg/支 148244-82-0
41834 α-倒捻子素 α-mangostin 曼果斯廷 20mg/支 1551491
41835 β-倒捻子素
41836 3-異倒捻子素
41837 菊苣酸 Cichoric Acid 20mg/支 6537-80-0
41838 梭砂貝母堿人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 10mg/支
41839 地膚子皂苷Ic Momordin Ic 20mg/支 96990-18-0
41840 大薊苷 Pectolinarin 柳穿魚(yú)葉苷 20mg/支 28978-02-1

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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