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上海紀寧酶聯科技有限公司
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*A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
*A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在*A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
42288 *苷H 供含量 常溫,避光 10mg 111913-201001
42289 4-羥基苯乙酸 供含量測定 常溫,避光 20mg 111916-201001
42290 女貞苷 供含量測定 常溫,避光 10mg 111918-201001
42291 瓜子金皂苷己 供含量測定 常溫,避光 20mg 111921-201001
42292 乙酰哈巴苷 供含量測定 常溫,避光 20mg 111925-201001
42293 醋酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100001-200504
42294 * 含量測定 常溫,避光 500mg 100002-200605
42295 (+)2-氨基丁醇 含量測定 常溫,避光 100mg 100003-200703
42296 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100004-200603
42297 苯丁酸氮芥 含量測定 常溫,避光 50mg 100005-199402
42298 苯甲酸雌二醇 含量測定 常溫,避光 100mg 100006-200504
42299 芐氟噻嗪 含量測定 常溫,避光 100mg 100007-200703
42300 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100008- 200505
42301 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100009-200704
42302 醋酸氟氫松 含量測定 常溫,避光 50mg 100010-200507
42303 * 鑒別 常溫,避光 50mg 100011-198501
42304 醋酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100012-200706
42305 *磷酸鈉 TCL法檢查 常溫,避光 100mg 100016-201015
42306 對氨基苯甲酸 含量測定 常溫,避光 100mg 100017-200509
42307 * 含量測定 常溫,避光 1000mg 100018-200408
42308 鹽酸咪唑雜質 檢查用 常溫,避光 30mg 100020-200604
42309 * 鑒別用 常溫,避光 100mg 100021-200503
42310 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100022-200403
42311 甘羅溴銨 含量測定 常溫,避光 100mg
42312 * 鑒別 常溫,避光 50mg 100023-198601
42313 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100025-200904
42314 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100026-200903
42315 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100028-199907
42316 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100030-200504
42317 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100031-200304
42318 * 常溫,避光 50mg 100032-
42319 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100033-200607
42320 枸櫞酸氯米芬 含量測定 常溫,避光 100mg 010034-200503
42321 甲磺酸雙氫麥角毒堿 常溫,避光 50mg
42322 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100037-200306
42323 鄰甲苯磺酰胺 檢查用 常溫,避光 100mg 100038-200803
42324 6-巰基嘌呤 檢查用 常溫,避光 100mg 100039-200602
42325 2-氯-4-硝基苯胺 檢查用 常溫,避光 50mg 100042-200002
42326 * 檢查用 常溫,避光 50mg 100043-199701
42327 馬來酸* 常溫,避光 50mg
42328 咪唑 檢查用 常溫,避光 50mg 100045-199903
42329 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100046-200504
42330 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100047- 200606
42331 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100048- 200902
42332 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100050- 200802
42333 * HPLC法含量測定 常溫,避光 50mg 100052- 200308
42334 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100053- 200705
42335 4-N-去甲基* 檢查用 常溫,避光 500mg 100054-9503
42336 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100055-200302
42337 * 含量測定 常溫,避光 1000mg 100057-200601
42338 乳糖 含量測定 常溫,避光 200mg 100058-200902
42339 美法侖 檢查用 常溫,避光 100mg 100059-200702
42340 * UV法含量測定 常溫,避光 50mg 100060-200302
42341 *3 含量測定 2-8℃,避光 100mg 100061-200607
42342 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 10062- 200608
42343 戊酸雌二醇 含量測定 常溫,避光 100mg 100063-199503
42344 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100065-200505
42345 * 含量測定 常溫,避光*A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 100mg 100066-200807
42346 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100067-200602
42347 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100068-199702
42348 鹽酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100069-200602
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5*A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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