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上海紀寧酶聯科技有限公司
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*E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
*E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在*E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
42349 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 0070-200405
42350 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100071-199905
42351 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100072-200402
42352 熒光母素 檢查用 常溫,避光 100mg 100075-197902
42353 左* 含量測定 常溫,避光 100mg 100076- 200703
42354 * 檢查用 常溫,避光 50mg 0082-9701
42355 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100084-200101
42356 * 含量測定 常溫,避光 50mg
42357 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100089-200301
42358 雙羥萘酸 含量測定 常溫,避光 50mg 100090-200301
42359 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100091-199601
42360 *(熔點℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100093-200804
42361 乙酰苯胺(熔點116℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100094-200204
42362 *(熔點℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100095-200204
42363 磺胺(熔點166℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100096-199404
42364 茴香酸(熔點185℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100097-199402
42365 *(熔點200℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100098-200804
42366 雙氰胺(熔點℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 10099-199402
42367 糖精(熔點229℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100100-200804
42368 *(熔點263℃) 熔點對照品 常溫,避光 1g 100102-199404
42369 水楊酸片 溶出度校正片 常溫,避光 20片/瓶 100103-200610
42370 * 鑒別 常溫,避光 50mg 0105-9902
42371 水楊酸 含量測定 常溫,避光 50mg 100106-200303
42372 α-甲基吡啶 檢查用 常溫,避光 50mg 100109-200201
42373 * 檢查用 常溫,避光 100mg 100110-200602
42374 * 含量測定 常溫,避光 50mg 10111-0103
42375 * 檢查用 常溫,避光 50mg 100114-199101
42376 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100117-200504
42377 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100118-200403
42378 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100119-200603
42379 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100120-200403
42380 醋酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100122-200804
42381 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100123-200303
42382 醋酸*龍 含量測定 常溫,避光 50mg 100124-200303
42383 醋酸* 含量測定 常溫,避光 50mg 10125- 200404
42384 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100126-200402
42385 膽石酸 檢查用 常溫,避光 50mg 100127-199701
42386 * 含量測定 常溫,避光 50mg 10128-0201
42387 * HPLC法含量測定 常溫,避光 50mg 100129-200804
42388 *堿 含量測定 常溫,避光 50mg 100130-200502
42389 對甲苯磺酰胺 檢查用 常溫,避光 50mg 100131-199501
42390 對羥基苯乙酰胺 檢查用 常溫,避光 50mg 100132-199701
42391 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100133-200602
42392 * 含量測定 常溫,避光 50mg 0134-9302
42393 * 含量測定 常溫,避光 50mg 10135-200404
42394 10%A晶型* 檢查用 常溫,避光 50mg 100136-199301
42395 過氧苯甲酰 鑒別 常溫,避光 100mg 100137-200701
42396 * 鑒別 常溫,避光 50mg 100139-199702
42397 6-甲氧基-2-萘乙酮 TLC法檢查用 常溫,避光 50mg 100140-200303
42398 N-甲基哌嗪 檢查用 常溫,避光 50mg 100141-199301
42399 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100142-201004
42400 硫噴妥 常溫,避光 100mg 100143-
42401 磷酸咯萘啶 含量測定 常溫,避光 100mg 100144-200502
42402 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100145-199501
42403 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100146-199502
42404 氯化* 檢查用 常溫,避光 50mg 100147-200302
42405 氯化琥珀* 檢查用 常溫,避光 50mg 100148-201002
42406 * 檢查用 常溫,避光*E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 50mg 100151-199202
42407 *龍 含量測定 常溫,避光 50mg 100153-199603
42408 腎上腺素 含量測定 2-8℃,避光 100mg 100154-200503
42409 *2 含量測定 2-8℃,避光 100mg 10155-200505
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5*E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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