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上海紀寧酶聯科技有限公司
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*G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
*G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在*G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
42473 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100230-200602
42474 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100232-200201
42475 環己胺 檢查用 常溫,避光 100mg 100233-200301
42476 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100234-200502
42477 己內酰胺 檢查用 常溫,避光 50mg 100235-199701
42478 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100237-200702
42479 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100238-199701
42480 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100239-200702
42481 鹽酸士的寧 含量測定 常溫,避光 100mg 100240-200701
42482 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100241-200503
42483 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100242-200402
42484 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100244-200502
42485 *鈉 檢查用 常溫,避光 50mg 100247-199601
42486 *12 含量測定 常溫,避光 100mg 100248-200802
42487 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100249-200902
42488 亞*鈣 含量測定 常溫,避光 100mg 100252-200703
42489 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100253-200201
42490 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100257-200903
42491 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100258-200904
42492 依他尼酸 檢查用 常溫,避光 50mg 100259-199701
42493 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100260-200902
42494 鹽酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100261-200802
42495 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100263-200301
42496 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100265-200602
42497 鹽酸羥嗪 含量測定 常溫,避光 100mg 100266-200201
42498 β-* 含量測定 2-8℃,避光 0.1ml 100268-200401
42499 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100269-200603
42500 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100270-200002
42501 金諾芬 常溫,避光 50mg 100272-
42502 麥芽三糖 檢查用 常溫,避光 100mg 100274-200601
42503 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100275-200702
42504 * 檢查用 常溫,避光 50mg 100276-199801
42505 大豆油 含量測定 2-8℃,避光 200mg 100277-200702
42506 對羥基苯甲酸甲酯 含量測定 常溫,避光 50mg 100278-200402
42507 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100279-200502
42508 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100280-201002
42509 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100281-200602
42510 * 常溫,避光 100mg 100283-
42511 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100284-200602
42512 麥芽糖 含量測定 常溫,避光 100mg 100287-200701
42513 尿素 含量測定 常溫,避光 50mg 100288-200201
42514 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100289-200902
42515 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100290-201002
42516 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100291-200402
42517 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100292-200201
42518 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100294-200602
42519 *鈉 HPLC法含量測定 常溫,避光 1000mg 100296-200303
42520 α-* 含量測定 常溫,避光 100mg 100298-201002
42521 * 鑒別用 常溫,避光 50mg 100299-200001
42522 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100300-200001
42523 阿司咪唑 含量測定 常溫,避光 50mg 100301-199901
42524 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100302-200602
42525 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100304-200502
42526 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100305-201003
42527 枸椽酸氯已定 鑒別 常溫,避光 50mg 100306-200201
42528 * 含量測定 2-8℃,避光 50mg 100307-200902
42529 氫* 含量測定 常溫,避光 100mg 100309-200702
42530 * 含量測定 常溫,*G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒避光 50mg 100310-200201
42531 3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯 檢查用 常溫,避光 50mg 100311-200201
42532 苯噻啶 檢查用 常溫,避光 50mg 10312-200001
42533 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100313-200301
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5*G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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