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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:14:20瀏覽次數(shù):183次
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人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
42838 4-異丁基乙酰苯 檢查用 常溫,避光 2ml 100722-200801
42839 * HPLC法含量測定 常溫,避光 50mg 100723-200401
42840 * TLC法鑒別 常溫,避光 100mg 100724-200401
42841 琥珀酸洛沙平 TLC法鑒別 常溫,避光 100mg 100724-200401
42842 * 有關(guān)物質(zhì) 常溫,避光 50mg 100725-200401
42843 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100727-200601
42844 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100728-200501
42845 鹽酸丁咯地爾 含量測定 常溫,避光 100mg 100729-200401
42846 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100730-200401
42847 * HPLC法含量測定 2-8℃,避光 50mg 100731-200401
42848 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100732-200501
42849 * UV法含量測定 常溫,避光 50mg 100733-200401
42850 苯甲酸* UV法含量測定 常溫,避光 100mg 100734-200401
42851 醋酸鈉 HPLC法含量測定 常溫,避光 50mg 100735-200401
42852 * HPLC法含量測定 常溫,避光 50mg 100736-200401
42853 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100737-200501
42854 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100741-200802
42855 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100742-200501
42856 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100744-200401
42857 磷酸 比色法含量測定 常溫,避光 100mg 100745-200401
42858 長春胺 含量測定 常溫,避光 100mg 100747-200501
42859 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100748-200401
42860 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100749-200501
42861 * UV含量測定 常溫,避光 100mg 100750-200601
42862 磷酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100751-200501
42863 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100752-200801
42864 * 常溫,避光 100mg 100753-
42865 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100754-201003
42866 阿佐塞米 含量測定 常溫,避光 100mg 100755-200401
42867 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100757-200501
42868 L-* 常溫,避光 30mg 100758-
42869 順式* 常溫,避光 30mg 100759-
42870 *鈉 含量測定 常溫,避光 100mg 100760-200501
42871 異*化合物Ⅲ 檢查用 常溫,避光 50mg 100762-200501
42872 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100763-200501
42873 *前體 檢查用 常溫,避光 50mg 100764-200501
42874 替尼泊苷 含量測定 常溫,避光 100mg 100765-200901
42875 替尼泊苷前體 檢查用 常溫,避光 50mg 100766-200801
42876 * 含量測定 2-8℃,避光 100mg 1000767-200601
42877 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100768-200501
42878 * 含量測定 常溫,避光 50mg 100769-200401
42879 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100770-200401
42880 貝那普利拉 供HPLC法系統(tǒng)適用性用 常溫,避光 30mg 100771-201001
42881 *雜質(zhì)A 檢查用 常溫,避光 20mg 100772-200401
42882 *雜質(zhì)B 檢查用 常溫,避光 20mg 100773-200401
42883 鹽酸*雜質(zhì)C 檢查用 常溫,避光 10mg 100774-200401
42884 * UV法含量測定 常溫,避光 100mg 100775-200401
42885 * UV法含量測定 常溫,避光 100mg 100776-200501
42886 * UV法含量測定 常溫,避光 100mg 100777-200401
42887 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100778-200501
42888 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100780-200801
42889 *雜質(zhì)1(4-[2-(3-乙基-2-氧-吡珞啉-1-甲酰胺基)乙基]苯 檢查用 常溫,避光 50mg 100781-200501
42890 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100782-200401
42891 * 檢查 常溫,避光 50mg 100783-200401
42892 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100784-200701
42893 D-焦* HPLC法有關(guān)物質(zhì)檢查 常溫,避光 50mg 100785-200701
42894 *雜質(zhì) 檢查用 常溫,避光 50mg 100786-200501
42895 * 含量測定用 常溫,避光 50mg 100787-200501
42896 3-吲哚甲酸 檢查用 常溫,避光 100mg 100788-200501
42897 *雜質(zhì) 檢查用 常溫,人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒避光 100mg 100788-200501
42898 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100789-200501
42899 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100790-200501
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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