大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒說明書
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
42963 5-{4-[2-(5-乙基-2-吡啶基)乙氧基]苯基亞甲基}-2,4-噻唑二酮 檢查用 常溫,避光 50mg 100881-200601
42964 鹽酸*雜質A 檢查用 常溫,避光 50mg 100881-200601
42965 酒石酸* HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100883-200601
42966 草酸* 含量測定 常溫,避光 100mg 100885-200601
42967 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100886-200601
42968 *中間體 檢查 常溫,避光 20mg 100887-200601
42969 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100889-200901
42970 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100893-200601
42971 S-* 檢查用 常溫,避光 30mg 100894-200701
42972 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100895-200601
42973 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100896-200601
42974 *二鈉 含量測定 常溫,避光 100mg 100897-200601
42975 *二鈉D-異構體 檢查用 2-8℃,避光 30mg 100898-200701
42976 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100899-200601
42977 *雜質 供系統適用性 常溫,避光 20mg 100900-200701
42978 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100901-200601
42979 鄰苯二甲酸 檢查用 常溫,避光 50mg 100903-200601
42980 *中間體 檢查用 常溫,避光 30mg 100904-200601
42981 5-鄰苯二甲酰亞胺乙酰丙酸 檢查用 常溫,避光 30mg 100904-200601
42982 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100905-200601
42983 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100907-200601
42984 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100912-200901
42985 * HPLC法含量測定 常溫,避光 100mg 100913-200701
42986 * HPLC法含量測定 2-8℃,避光 100mg 100917-200701
42987 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100918-200701
42988 地* 含量測定 常溫,避光 100mg 100919-200701
42989 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100920-200801
42990 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100921-200701
42991 鹽酸苯乙雙胍 常溫,避光 100mg 100922-
42992 7-表-10去乙酰基* 系統適用性 常溫,避光 30mg 100925-200701
42993 *雜質A 系統適用性 常溫,避光 30mg 100925-200701
42994 三尖杉寧堿 供檢查用 常溫,避光 30mg 100926-200701
42995 7-表* 供檢查用 常溫,避光 30mg 100927-200701
42996 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100928-200701
42997 雌三醇 含量測定 常溫,避光 100mg 100934-200701
42998 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100938-200701
42999 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100939-200701
43000 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100941-200701
43001 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100942-200701
43002 * UV法含量測定 2-8℃,避光 100mg 100943-201001
43003 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100947-200701
43004 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100948-200801
43005 * 供HPLC法系統適用性試驗用 常溫,避光 100mg 100949-201001
43006 福辛普利拉 含量測定 常溫,避光 50mg 100951-200801
43007 枸櫞酸鉍* 供檢查用 常溫,避光 100mg 100957-200801
43008 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100959-200801
43009 水楊酸愈創木酚酯 TLC法有關物質 常溫,避光 50mg 100960-200801
43010 *雜質A TLC法有關物質 常溫,避光 50mg 100960-200801
43011 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100964-200701
43012 3-甲基黃酮-8-羧酸 供檢查用 常溫,避光 100mg 100965-200701
43013 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100966-200701
43014 * HPLC法含量測定 常溫,避光 250mg 100968-201001
43015 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100976-200701
43016 扁桃酸 鑒別 常溫,避光 100mg 100980-200701
43017 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100982-200701
43018 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100986-200801
43019 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100988-200901
43020 布* 含量測定 常溫,避光 100mg 10098-200801
43021 * 含量測定 常溫,避光 人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒100mg 100991-200901
43022 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100993-200701
43023 * 含量測定 常溫,避光 100mg 100996-200701
43024 * UV法含量測定 常溫,避光 100mg 100997-200701
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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