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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
43145 * 效價測定 2-8℃,避光 100mg 130320-200709
43146 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130326-200314
43147 粘菌素 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130327-200305
43148 *SV 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130333-200907
43149 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130335-200204
43150 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130337-9803
43151 去甲* 效價測定 2-8℃,避光 150mg 130338-200303
43152 卷曲霉素 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130339-9802
43153 * 效價測定 2-8℃,避光 400mg 130341-9402
43154 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130342-200703
43155 * 效價測定 2-8℃,避光 300mg 130344-
43156 磺芐西林 含量 2-8℃,避光 100mg 130345-200802
43157 乙酰* 效價測定 2-8℃,避光 約200mg 130347-200403
43158 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130348-9301
43159 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130350-200001
43160 羅* 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130351-200303
43161 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130352-200706
43162 西梭米星 效價測定 2-8℃,避光 150mg 130353-200001
43163 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130354-200001
43164 奈替米星 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130355-200702
43165 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130356-200403
43166 吉它霉素 效價測定及組分測定 2-8℃,避光 200mg 130357-9901
43167 * 效價測定 2-8℃,避光 100mg 130359-200301
43168 * 效價測定 2-8℃,避光 100mg 130360-200301
43169 丙酸* 效價測定 2-8℃,避光 100mg 130361-200301
43170 醋酸* 效價測定 2-8℃,避光 100mg 130362-200301
43171 依替米星 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130365-200702
43172 * 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130371-200305
43173 乙酰吉它霉素 效價測定 2-8℃,避光 200mg 130372-200301
43174 * 效價測定 2-8℃,避光 100mg 130375-200701
43175 4-差向四環素 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130401-200209
43176 脫水四環素 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130402-200203
43177 脫水差向四環素 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130403-200204
43178 4-差向* 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130404-200209
43179 β-* 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130405-200405
43180 * 含量測定 2-8℃,避光 150mg 130407-200707
43181 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 130408-200710
43182 * 含量測定 2-8℃,避光 100mg 130409-201011
43183 * 含量測定 2-8℃,避光 100mg 130410-200706
43184 新霉胺 雜質檢查 2-8℃,避光 100mg 130411-200307
43185 *S異構體 系統適應性 2-8℃,避光 50mg 130412-200902
43186 醌式* 檢查 2-8℃,避光 100mg 130413-200303
43187 3-甲基*SV 檢查 2-8℃,避光 50mg 130414-8702
43188 α-苯* 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130415-200904
43189 7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸 雜質檢查 2-8℃,避光 50mg 130416-201006
43190 無味*A晶型 檢查 2-8℃,避光 100mg 130417-8701
43191 無味*B晶型 檢查 2-8℃,避光 100mg 130418-8701
43192 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 130419-200103
43193 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 130420-200304
43194 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 0421-9603
43195 * 含量測定 2-8℃,避光 100mg 130422-200705
43196 * HPLC法含量測定 2-8℃,避光 200mg 0423-9902
43197 鹽酸* 含量測定 2-8℃,避光 8mg 130424-200303
43198 琥乙* 檢查 2-8℃,避光 200mg 0425-200002
43199 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 0426-9101
43200 * 含量測定 2-8℃,避光 200mg 130427-200306
43201 *雜質A 檢查 2-8℃,避光 100mg 130428-200503
43202 克拉維酸 含量測定 2-8℃,避光 50mg 130429-200905
43203 舒巴坦 含量測定 2-8℃,避光 200mg 130430-200305
43204 * 含量測定 2-8℃,人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒避光 100mg 130431-200802
43205 * 含量測定 2-8℃,避光 100mg 130432-200908
43206 * HPLC法含量測定 2-8℃,避光 50mg 130433-200502
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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