人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

43437 前列腺素B1 供* -20℃，避光 見(jiàn)標(biāo)示量 140791-200801
43438 N-乙酰-半*1-* 供* 密封，4℃保存 2mg 140793-201001
43439 脫蘇氨醇8奧曲肽 供* 密封，4℃保存 2mg 140795-201001
43440 游離甲狀腺素 553/380fmol 150001-
43441 游離三碘甲狀腺原氨酸 552/362fmol 150002-
43442 洋地黃 效價(jià)測(cè)定 2-8℃，避光 約2.5g 501-8004
43443 垂體后葉 效價(jià)測(cè)定 2-8℃，避光 約30mg 502-8709
43444 胰島素（豬） 效價(jià)測(cè)定 -20℃，避光 20mg/支 504-8708
43445 豬胰島素（高純〕 效價(jià)測(cè)定 -20℃，避光 20mg/支 150505-9609
43446 * 效價(jià)測(cè)定 2-8℃，避光 約2.5g 150506-8906
43447 磷酸組胺 檢查用 2-8℃，避光 25mg/支 150510-200412
43448 * 效價(jià)測(cè)定 -20℃，避光 60IU/支 150513-200409
43449 毒毛旋花子苷G 效價(jià)測(cè)定 2-8℃，避光 20mg/支 150514-870405
43450 豬胰島素原 試劑盒測(cè)試 -20℃，避光 2.2μg/支 523-8901
43451 人絕經(jīng)*(HMG) 效價(jià)測(cè)定 -20℃，避光 FSH190IU、LH242IU/支 150524-200503
43452 *(合成) 效價(jià)測(cè)定 -20℃，避光 21IU/支 050529-200902
43453 促甲狀腺素（TSH） 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 600μIU 150530-0312
43454 促黃體生成激素（LH） 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 930mIU 150531-201003
43455 泌乳素 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 9mIU/支 150532-0004
43456 促卵泡生成素 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 450mIU/支 150533-0212
43457 生長(zhǎng)激素 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 1.22mIU/0.61ug/支 534-9604
43458 *β亞單位 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 240ng/0.5ml/支 150535-201002
43459 人胎盤泌乳素（HPL） 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 14.2μg/支 150536-9903
43460 鐵蛋白 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 2ug/支 540-9410
43461 癌胚抗原 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 320ng/支 150541-0210
43462 甲胎蛋白 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 800ng/661IU/支 150542-0004
43463 前列腺特異抗原 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 150ng/支 150543-0004
43464 游離前列腺特異抗原 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 0.5ml/支 150544-200702
43465 三碘甲腺原氨酸 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 50ng/支 150550-0004
43466 甲狀腺素 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 1000ng/支 150551-0004
43467 反三碘甲腺原氨酸 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 23ng/支 150552-0004
43468 人胰島素C-肽 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 21ng/支 150553-9911
43469 胰高血糖素 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 19ng/支 150554-9604
43470 * 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 22.8IU/支 150555-9003
43471 抗甲狀腺球蛋白抗體 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 4000IU/支 150556-200601
43472 抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 免疫測(cè)定用 -20℃，避光 430IU/支 150557-200601
43473 細(xì)菌內(nèi)毒素 檢查 -20℃，避光 10000EU/支 150600-200707
43474 細(xì)菌內(nèi)毒素（工作品） 檢查 -20℃，避光 10支/盒 150601-201072
43475 細(xì)菌內(nèi)毒素（精品） 可用于建立動(dòng)物發(fā)熱模型 -20℃，避光 1mg/支 150602-200502
43476 06-單乙酰*鹽酸鹽 20mg
43477 O3-單乙酰*氨基磺酸鹽 含量測(cè)定 20mg 171208-200609
43478 乙酰可待因 含量測(cè)定 20mg 171209-200507
43479 * 含量測(cè)定 100mg 171224-200403
43480 氯* 含量測(cè)定 自取 100mg 171227-200302
43481 2-氨基-2’-氯-5-硝基二苯酮 檢查 100mg 171228-200602
43482 鹽酸甲基愛(ài)康寧 20mg
43483 苯甲酰愛(ài)康寧 含量測(cè)定 20mg 171233-200606
43484 鹽啡 含量測(cè)定 自取 20mg 171244-200704
43485 * 含量測(cè)定 20mg 171246-200301
43486 鹽酸納曲酮 含量測(cè)定 20mg 171249-200802
43487 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮 檢查 100mg 171254-200401
43488 *雜質(zhì)B 檢查 100mg 171254-200401
43489 鹽酸* 鑒別 自取 100mg 171256-200401
43490 2-氨基-5-硝基二苯酮 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171267-201001
43491 *雜質(zhì) 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171267-201001
43492 2-氨基-5-氯二苯酮 有關(guān)物質(zhì) 50mg/支 171268-201001
43493 氯氮卓雜質(zhì)Ⅰ 有關(guān)物質(zhì)人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 50mg/支 171268-201001
43494 N-脫烷基西泮 有關(guān)物質(zhì) 20mg 171270-201001
43495 *雜質(zhì) 有關(guān)物質(zhì) 20mg 171270-201001

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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