大鼠17β-羥基甾體脫氫酶2(17β-HSD2)ELISA試劑盒廠家
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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
43646 芹菜苷元-7-葡萄糖標準品 Apigenin-7-glucoside 30mg 578-74-5
43647 鹽酸阿撲*標準品 Apomorphine Hydrochloride 250mg 41372-20-7
43648 鹽酸阿可樂定標準品 Apraclonidine Hydrochloride 100mg 73218-79-8
43649 阿瑞吡坦對照品標準品 Aprepitant 50mg
43650 阿瑞吡坦相關化合物A標準品 10mg
43651 L-阿拉伯糖醇標準品 L-Arabinitol 500mg 7643-75-6
43652 L-*標準品 L-Arginine 200mg 74-79-3
43653 鹽酸*標準品 Arginine Hydrochloride 125mg 1119-34-2
43654 *標準品 200mg
43655 *雜質C標準品 ea
43656 *雜質B標準品 ea
43657 *相關物質F標準品 25mg
43658 *相關物質G標準品 25mg
43659 阿散酸標準品 Arsanilic Acid 25mg 98-50-0
43660 *相關物質H標準品 25mg
43661 *標準品 Artemether 100mg 71963-77-4
43662 *相關物質A標準品 Artemether Related Compound A 15mg 71939-50-9
43663 *相關物質B標準品 15mg 88495-63-0
43664 青*標準品 Artesunate 200mg 88495-63-0
43665 阿替卡因標準品 Articaine 40mg 23964-58-1
43666 *標準品 Articaine Hydrochloride 125mg 23964-57-0
43667 阿替卡因相關物質A標準品 Articaine Related Compound A 40mg
43668 阿替卡因相關物質E標準品 Articaine Related Compound E 40mg
43669 *標準品 Ascorbic Acid (Vitamin C) 1g 50-81-7
43670 *棕櫚酸酯標準品 Ascorbyl Palmitate (AS) 2g 137-66-6
43671 醉茄粉末提取物標準品 Powdered Ashwagandha Extract 1g 90147-43-6
43672 無水天冬酰胺標準品 Asparagine Anhydrous 200mg 70-47-3
43673 一水天冬酰胺標準品 Asparagine Monohydrate 200mg 5794-13-8
43674 阿斯巴甜標準品 Aspartame 200mg 22839-47-0
43675 阿斯巴甜相關物質A標準品 25mg 1228222
43676 阿斯巴甜安賽蜜標準品 Aspartame Acesulfame 200mg 106372-55-8
43677 *標準品 Aspartic Acid 100mg 1825910
43678 *標準品 Aspirin 500mg 50-78-2
43679 阿司咪唑標準品 Astemizole 200mg 68844-77-9
43680 *標準品 Atenolol 200mg 29122-68-7
43681 *鈣標準品 Atorvastatin Calcium 100mg 344423-98-9
43682 *相關物質A標準品 20mg 433289-83-9
43683 *相關物質B標準品 20mg 887196-25-0
43684 *相關物質C標準品 20mg 693793-53-2
43685 *相關物質D標準品 20mg 148146-51-4
43686 *相關物質E標準品 10mg 1105067-88-6
43687 *鈣雜質H對照品標準品 20mg
43688 *鈣雜質I對照品標準品 20mg
43689 阿托伐醌標準品 Atovaquone 200mg 95233-18-4
43690 阿托伐醌相關物質A標準品人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒 25mg
43691 苯磺酸阿曲庫銨標準品 Atracurium Besylate 100mg 64228-81-5
43692 阿伏苯宗標準品 Avobenzone 500mg 70356-09-1
43693 金硫葡糖標準品 Aurothioglucose 100mg 12192-57-3
43694 阿扎胞苷相關物質C標準品 ea
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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