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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
44806 *外消旋混合物標準品 Levetiracetam Racemic Mixture 15mg 33996-58-6
44807 *相關物質A標準品 20mg 102767-31-7
44808 *相關物質B標準品 20mg 7682-20-4
44809 鹽酸布諾洛爾標準品 Levobunolol Hydrochloride 200mg 27912-14-7
44810 *標準品 Levocabastine Hydrochloride 50mg 79547-78-7
44811 左卡巴斯汀相關物質A標準品 50mg 80139-91-9
44812 *標準品 Levocarnitine 400mg 541-15-1
44813 *相關物質A標準品 100mg 6538-82-5
44814 多巴標準品 Levodopa 200mg 59-92-7
44815 多巴相關物質A標準品 50mg 27244-64-0
44816 左*標準品 Levofloxacin 350mg 138199-71-0
44817 左*相關物質A標準品 25mg 117707-40-1
44818 左*相關物質B標準品 35mg 100986-89-8
44819 左*雜質C標準品 25mg 177472-30-9
44820 左美諾醇標準品 Levomenol 100mg 23089-26-1
44821 異腎上腺素標準品 Levonordefrin 200mg 829-74-3
44822 甲*標準品 Levonorgestrel 200mg 797-63-7
44823 萘磺酸左丙氧芬標準品 Levopropoxyphene Napsylate 300mg 55557-30-7
44824 酒石酸*標準品 Levorphanol Tartrate CII 500mg 5985-38-6
44825 甲狀腺素標準品 Levothyroxine 500mg 51-48-9
44826 甲狀腺素標準品(峰值定性用) 15mg
44827 *標準品 Lidocaine 250mg 137-58-6
44828 鹽酸*標準品 Lincomycin Hydrochloride 200mg 7179-49-9
44829 林丹標準品 Lindane 200mg 58-89-9
44830 亞油酯酰聚氧甘油酯標準品 Linoleoyl Polyoxylglycerides 100mg
44831 碘噻羅寧標準品 Liothyronine 250mg 6893/2/3
44832 α-*標準品 Alpha Lipoic Acid 500mg 1077-28-7
44833 *標準品 Lisinopril 300mg 83915-83-7
44834 *相關物質A標準品 15mg 328385-86-0
44835 *標準品 Lithium Carbonate 300mg 554-13-2
44836 *標準品 Loperamide Hydrochloride 200mg 34552-83-5
44837 洛匹那韋標準品 Lopinavir 350mg 192725-17-0
44838 洛匹那韋系統適配物標準品 10mg
44839 氯碳頭孢標準品 Loracarbef 200mg 121961-22-6
44840 氯碳頭孢L-異構體標準品 Loracarbef L-Isomer 25mg
44841 *相關雜質C標準品 15mg 31251-41-9
44842 *標準品 Loratadine 200mg 79794-75-5
44843 *相關物質A標準品 15mg 100643-71-8
44844 *相關物質B標準品 15mg 38092-89-6
44845 *標準品 Lorazepam CIV 200mg 846-49-1
44846 *相關物質A標準品 Lorazepam Related Compound A 25mg 2848-96-6
44847 *相關物質B標準品 Lorazepam Related Compound B 25mg 2958-36-3
44848 *相關物質C標準品 Lorazepam Related Compound C 25mg 93955-15-8
44849 *相關物質D標準品 Lorazepam Related Compound D 25mg 54643-79-7
44850 *相關物質E標準品 Lorazepam Related Compound E 25mg 773871-49-1
44851 *標準品 Losartan Potassium 250mg 124750-99-8
44852 *標準品 Lovastatin 125mg 75330-75-5
44853 *相關物質A標準品人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 20mg 77517-29-4
44854 *標準品 Loxapine Succinate 125mg 27833-64-3
44855 洛沙平相關物質A標準品 Loxapine Related Compound A 20mg 3454-96-4
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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